[发明专利]一种神经退行性疾病的动物模型的构建方法

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种神经退行性疾病动物模型的构建方法。本发明的神经退行性疾病的动物模型的构建方法，包括以下步骤：选择出生后1～10天的动物；对所述动物按3～5g/kg剂量注射谷氨酸钠溶液，连续注射3～12天。本发明的动物模型是通过在出生后血脑屏障尚未闭合时直接对下丘脑‑垂体‑肾上腺轴进行干预，造成直接的神经细胞损伤，伴随动物的生长出现渐进式的神经退行性病变的特征，该模型的构建方法成本较低、成模率较高、病理变化更加符合临床特征，与市面上其他传统造模方法相比，具有疾病发生渐进性和患慢性、无明显的手术创伤、不需要物理性干预等优势，非常适用于神经退行性病变及其药物疗效评价。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一类神经退行性疾病动物模型的构建方法。

背景技术

神经退行性疾病(Neurodegenerative Disease,NDD)是由神经元和神经髓鞘丧失所导致，该疾病可随着时间的推移逐渐恶化，从而出现一系列功能障碍相关疾病，包括脑缺血、认知障碍、血管性痴呆、帕金森、青光眼、阿尔兹海默等。

NDD的发生最主要由氧化应激、线粒体功能障碍、兴奋性毒素和免疫炎症四种病因导致。目前市面上用于此类疾病的动物模型包括自然衰老动物模型、SAMP8(快速老化)小鼠模型、Aβ注射诱导模型、侧脑室注射链脲菌素诱导模型、慢性缺氧动物模型、APP转基因小鼠模型、Apoe敲除小鼠模型等。上述动物模型使用的方法包括鱼线栓塞造成脑中动脉缺血、使用转基因或基因敲除动物来模拟老年痴呆和帕金森疾病，或是将动物饲养至老年诱发神经退行性病变，还有利用其他神经兴奋性制剂诱导动物颅内神经系统损伤。上述方法多采用物理强制性造成脑部缺血，或采用复杂的基因编辑或是敲除方法造成神经病变，其造模原理多局限在(1)通过自然时间进程引起衰老表现；(2)通过物理性注射直接破坏已成年动物脑室，从而造成不可逆损伤；(3)通过缺氧等物理手段影响氧化应激通路；(4)利用转基因技术获得生理缺陷的动物模型。上述模型动物均缺乏从正常状态到疾病状态的渐进过程，而神经退行性病变恰恰是一种慢性的、动态性的、进展性的疾病，而不是采用某种方式使动物突然出现明显损伤。

因此，这些动物模型所产生的神经病变特征与临床发病特征有较大区别，严格意义上讲不属于渐进式或退行性病变，这些模型均无法模拟临床上退行性的过程，例如脑组织缺血特征是由于采用物理方法直接堵塞血管，造成脑部急性缺血，这和临床脑卒中患者神经系统退行性进展有很大差异；由于神经病变不是退行性的，因此也很难产生早期认知障碍特征；在一些典型体现神经退行性病变发生的脏器或组织上，也很难看到明显变化等。

发明内容

本发明的目的在于提供一类具有神经退行性特征的动物疾病模型的构建方法。

根据本发明具体实施方式的神经退行性疾病的动物模型的构建方法，包括以下步骤：选择出生后1～10天的动物；对所述动物按3～5g/kg剂量注射谷氨酸钠溶液，连续注射3～12天。

本发明中，采用刚刚出生的动物作为造模对象，此时动物血脑屏障(blood-brainbarrier,BBB)尚未完全闭合，导致其具有一定通透性，可使大分子物质自由地进入脑中，在出生后一周内，持续颅内/皮下给与谷氨酸钠，可使谷氨酸钠顺利通过BBB，从而引起神经兴奋性毒性。谷氨酸钠是一种由谷氨酸和钠离子形成的盐，在血脑屏障尚未闭合的时候给与谷氨酸钠，可对颅内神经细胞造成直接损伤，进而伴随生命体成长逐渐出现渐进式的神经损伤情况，其特征与临床上患病人员漫长的神经退化现象十分接近。