[发明专利]一种功能性香蕉多糖BPF2及其制备与应用

说明书

本发明属于食品、医药化工技术领域，具体公开了一种功能性香蕉多糖BPF2的制备方法，包括以下步骤：S1、将香蕉果肉打浆，使用体积浓度≤15％乙醇水溶液提取；S2、采用体积浓度≥95％的乙醇沉淀多糖；S3、对S2得到的多糖进行纯化，得到香蕉多糖BPF2。本发明还公开了上述制备方法获得的香蕉多糖BPF2，以及香蕉多糖BPF2在制备药品或食品上的应用。本发明提供的香蕉多糖BPF2对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力和总抗氧化能力显著；能显著激活RAW264.7细胞的增殖活性和吞噬活性，诱导并促进抑炎细胞因子分泌，能够抑制炎症反应；能够通过抑制人视网膜色素上皮细胞ARPE‑19迁移，降低ARPE‑19细胞VEGF和ICAM‑1的表达，缓解视网膜病变。

技术领域

本发明属于食品、医药化工技术领域，尤其涉及一种功能性香蕉多糖BPF2及其制备与应用。

背景技术

香蕉，属巴蕉科(Musaeae)巴蕉属(musa)，为草木果树。我国的香蕉资源丰富，食用和药用价值极高，目前对香蕉的研究开发主要集中在香蕉的生产和粗加工上，如香蕉饮料、香蕉酒和香蕉干等，对于香蕉的活性研究还较少。

香蕉多糖是存在于成熟香蕉中的一种含量较高的可溶性多糖物质，目前已有文献报道其具有一定的免疫调节作用，能够促进肠道有益菌的增殖，具有调节胃肠道健康和缓解疾病等功效。目前，越来越多的人由于工作和生活压力、快节奏的饮食作息而引起一些亚健康状态，例如代谢功能失衡、眼睛疲劳、视力受损和身体加速衰老等，这些亚健康状态的产生不仅会降低人们的生活质量，也可能是引起某些重大疾病的根源所在，所以研究香蕉多糖并基于其开发的产品，具有广阔的市场前景。

Yang,J等人(Yang,J,et al.,Identification of an immunostimulatorypolysaccharide in banana,Food Chemistry(2018))根据(Tong,et al.,2016；65Ye,etal.,2018)的文献报道对香蕉多糖进行提取，具体步骤如下：将香蕉果肉用80％(v/v)的乙醇水溶液提取，去除可溶于乙醇的化学物质，按重量将十倍的水加入到粒料中。在60℃孵育6h后，收集并浓缩上清液。加入乙醇至终浓度为60％，在4℃的冰箱中孵育过夜以沉淀粗多糖。第二天将粗多糖重新溶解，添加相同体积的Sevag试剂(氯仿/丁醇＝4:1,v/v)。保持烧瓶摇晃30min以去除蛋白质。使用装有DEAE Sepharose Fast Flow的中压玻璃柱(15×460mm)进行纯化。装入10mL 30mg/ml多糖进行洗脱，洗脱方法为：用磷酸盐缓冲液(pH 7.0)洗脱80min，然后用NaCl溶液(0.2和0.8M NaCl，每个梯度80min)梯度洗脱，流速为4.0mL/min。采用磷酸盐缓冲液洗脱的部分通过Sephadex G-100柱(15×460mm)进行进一步纯化。装载2mL 30mg/mL的多糖。磷酸盐缓冲液(150mL)用作洗脱溶剂，流速为0.5mL/min。收集主峰，浓缩，冻干得到香蕉多糖NBPP，经鉴定为α-(1→6)-D-葡聚糖，分子量2990KD。

Wei Guo等人分离纯化的香蕉多糖BPA为以β-D-(1→6)-半乳聚糖为骨架的阿拉伯半乳聚糖，该阿拉伯半乳聚糖由三种单糖组成，包括Ara(阿拉伯糖)、Gal(半乳糖)和GlcA(葡萄糖酸)，摩尔比为5.8:5.9:1.0，分子量测定为526.2KD。

上述文献报道的分离纯化方法或得到的香蕉多糖存在以下问题：通过过柱对香蕉多糖分离纯化，步骤较为繁琐；获得的香蕉多糖分子量范围较大，不均一；去除多糖中蛋白杂质采用是Sevag试剂(Sevag方法)，所用的有机试剂毒性大且操作复杂，不适用于食品、药品及保健品的生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种功能性香蕉多糖BPF2及其制备与应用，以至少解决上述技术问题之一。

本发明的目的之一在于提供：一种功能性香蕉多糖BPF2的制备方法，包括以下步骤：

S1、将香蕉果肉打浆，使用体积浓度≤15％乙醇水溶液提取；