[发明专利]一种幽门螺杆菌快速增菌培养试剂及其制备方法

权利要求书

1.一种幽门螺杆菌快速增菌培养试剂，其特征在于：所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂包括第一幽门螺杆菌培养试剂和第二幽门螺杆菌培养试剂；所述的第一幽门螺杆菌培养试剂的原料组分包括猪脑心肝组织提取物、GSE-1细胞裂解提取物、胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钠、蒸馏水；所述的第二幽门螺杆菌培养试剂的原料组分包括D-葡萄糖、尿素、胎牛血清、万古霉素、多粘菌素B、硫酸铜、硫酸锌、硫酸亚铁、硫酸锰、维生素B6、去离子水。

2.根据权利要求1所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂，其特征在于：每900ml所述的第一幽门螺杆菌培养试剂的原料组分的配比为猪脑心肝组织提取物4克、GSE-1细胞裂解提取物2克、胰酪蛋白胨15克、大豆蛋白胨5克、氯化钠5克、磷酸氢二钠2.5克、蒸馏水900mL。

3.根据权利要求1所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂，其特征在于：每500ml所述的第二幽门螺杆菌培养试剂的原料组分的配比为D-葡萄糖20克、尿素5克、胎牛血清200mL、万古霉素100mg、多粘菌素B 125mg、硫酸铜0.1μmol、硫酸锌0.09μmol、硫酸亚铁0.09μmol、硫酸锰0.06μmol、维生素B6 0.1μmol、余量为去离子水。

4.根据权利要求1所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂，其特征在于：所述的猪脑心肝组织提取物的制备方法包括如下步骤：分别取猪脑、心、肝三种脏器各200克，无菌剪成碎片，生理盐水洗涤去除残留的红细胞，将上述组织完全浸泡于800mL 0℃的无菌冰水，浸泡48小时后，经800目无菌不锈钢网过滤除杂，冷冻干燥成粉末，制得所述的猪脑心肝组织提取物。

5.根据权利要求1所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂，其特征在于：所述的GSE-1细胞裂解提取物的制备方法包括如下步骤：采用5×10⁹的GES-1细胞经细胞刷刮取，取1500g离心15min收集细胞，无菌生理盐水重悬洗涤3次，每次1500g离心15min收集细胞；加入无菌生理盐水，调节至100毫升，使用高压均质仪于4℃破碎细胞，收集上清液，10000g离心60min，收集上清经0.22微米滤过膜过滤除菌，冷冻干燥，制得所述的GSE-1细胞裂解提取物。

6.权利要求1-5任一所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂的制备方法，其特征在于：所述的的制备方法，步骤如下：

S1.在蒸馏水中加入猪脑心肝组织提取物、GSE-1细胞裂解提取物、胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钠，加热搅拌溶解，高温灭菌，制得第一幽门螺杆菌培养试剂，备用；

S2.在去离子水中加入D-葡萄糖、尿素、胎牛血清、万古霉素、多粘菌素B、硫酸铜、硫酸锌、硫酸亚铁、硫酸锰、维生素B6，搅拌均匀，过滤除菌，制得第二幽门螺杆菌培养试剂，备用；

S3.将第一幽门螺杆菌培养试剂和第二幽门螺杆菌培养试剂进行混合，制得所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂。

7.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述的高温灭菌为在121℃下灭菌15分钟。

8.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述的过滤除菌为采用0.22m滤膜过滤除菌。

9.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌快速增菌培养试剂的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述的第一幽门螺杆菌培养试剂和第二幽门螺杆菌培养试剂的体积比为9：1。