[发明专利]一种杂交瘤细胞株、单克隆抗体、检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种杂交瘤细胞株、单克隆抗体、检测试剂盒及检测方法，涉及食品安全检测技术领域。杂交瘤细胞株SZC1H3保藏编号为CGMCC No.45002。分泌的单克隆抗体可以同时识别三唑酮、三唑醇和多效唑，且均具有较高的检测灵敏度，与其他的三氮唑农药类似物的交叉反应率很小，也即杂交瘤细胞SZC1H3产生的抗体对三唑酮、三唑醇和多效唑有很好的特异性。该单克隆抗体为建立同时检测多效唑、三唑酮与三唑醇的免疫学检测方法提供了良好的抗体支持。获得的单克隆抗体可以用于三唑酮、三唑醇、多效唑的检测。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体而言，涉及一种杂交瘤细胞株、单克隆抗体、检测试剂盒及检测方法。

背景技术

三氮唑类农药在农业生产中扮演着重要的作用，其中，多效唑、三唑酮、三唑醇是最为常用的三种三氮唑类农药。多效唑又名氯丁唑，是一种植物生长调节剂和广谱杀菌剂，可抑制植株中赤霉素和固醇的生物合成，在农业生产过程中常用于促进花芽分化，矮化植株，延缓营养生长、促果实生长与增产等。三唑酮是一种广谱三氮唑类杀菌剂，低毒内吸性强，用于防治植株被真菌病毒侵害。三唑醇为三唑酮的代谢产物，其杀菌活性强于母体。

已有研究表明，多效唑不易降解，易在食物上残留，在土壤中的残留也对于后茬作物产生较大影响；三唑酮与三唑醇具有神经、生殖和基因毒性，可致癌致畸。在农作物例如花生、小麦、油菜、水稻，以及中药材例如麦冬的种植生产中，存在多效唑与三唑酮同时施用并造成农药残留的情况，对生物体与环境都存在危害性，因此同时监测多效唑、三唑酮及其代谢物三唑醇具有重要的现实意义。

传统仪器检测方法虽然灵敏度高、准确性好，但是由于前处理步骤复杂繁琐，仪器体积大且昂贵，对操作人员专业性要求高等缺点，而免疫分析法具有操作简单，快速便捷，成本低可携带等优点，更加适用于三氮唑类农药残留的现场快速筛查。但目前免疫分析领域中目前并没有可以同时检测多效唑、三唑酮、三唑醇的抗体，若要实现同时检测这三种三氮唑类农药需要不同的两种甚至三种抗体，检测成本增加，且检测效率不高。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种杂交瘤细胞株、单克隆抗体、检测试剂盒及检测方法以解决上述技术问题。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种杂交瘤细胞株，其包括2021年12月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的杂交瘤细胞株SZC1H3，保藏编号为CGMCC No.45002。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

发明人提供了一株杂交瘤细胞株SZC1H3，由该细胞株制备的单克隆抗体可同时识别多效唑、三唑酮与三唑醇，且均具有较高的检测灵敏度，可以应用于建立同时检测多效唑、三唑酮与三唑醇的免疫学检测方法。

本发明还提供了一种单克隆抗体，由上述的杂交瘤细胞株分泌获得。

在本发明应用较佳的实施方式中，上述单克隆抗体分别具有如SEQ ID NO.1所示的重链可变区核苷酸编码序列和如SEQ ID NO.2所示的轻链可变区核苷酸编码序列。

上述单克隆抗体分别具有如SEQ ID NO.3所示的重链可变区氨基酸序列和如SEQID NO.4所示的轻链可变区氨基酸序列。

SEQ ID NO.1所示的重链可变区核苷酸编码序列如下：