[发明专利]一种3D干细胞微球胶囊、其制备方法及在移植治疗领域的应用有效
申请号: | 202210102613.0 | 申请日: | 2022-01-27 |
公开(公告)号: | CN114376985B | 公开(公告)日: | 2023-05-09 |
发明(设计)人: | 葛少华;赵雅君;李建华;郭曼莉 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | A61K9/50 | 分类号: | A61K9/50;A61K47/26;A61K47/02;A61K35/28;A61K35/545;A61P1/02;A61P19/08;C12N5/0775 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李筝 |
地址: | 250012 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 干细胞 胶囊 制备 方法 移植 治疗 领域 应用 | ||
1.一种3D干细胞微球胶囊,其特征在于,所述3D干细胞微球胶囊包括内核和壳层,所述内核为干细胞微球,壳层为FeIII-TA构成的包覆涂层;所述涂层中,金属离子Fe3+通过配位作用与单宁酸结合形成复合物;
所述金属离子的来源为氯化物,所述氯化物的浓度为0.1~20 mg/mL;所述氯化物与单宁酸的质量比为1:1~100;
所述包覆涂层的层数为1~8层;
所述干细胞为牙周膜干细胞;
所述3D干细胞微球胶囊的制备方法如下:将单宁酸和Fe3+溶液依次加入干细胞微球的悬液中混匀,再加入缓冲溶液调节体系pH值,即可得到所述3D干细胞微球胶囊;所述缓冲溶液为pH=7~8的3-吗啉丙磺酸缓冲液,所述3-吗啉丙磺酸缓冲液浓度为15~25mM。
2.如权利要求1所述3D干细胞微球胶囊,其特征在于,所述包覆涂层的层数为1~5层。
3.权利要求1-2任一项所述3D干细胞微球胶囊的制备方法,其特征在于,所述干细胞微球的制备方式为悬滴法,具体制备方式如下:收集干细胞加入少量培养基重悬获得干细胞培养液,将所述干细胞培养液接种于培养皿盖上,翻转培养皿使培养液形成悬液,孵育一段后获得干细胞微球。
4.如权利要求3所述3D干细胞微球胶囊的制备方法,其特征在于,所述干细胞微球制备方法的具体步骤如下:
向贴壁生长的干细胞中加入消化液、清洗并收集,加入少量培养液重悬获得干细胞悬液并进行细胞计数,将干细胞悬液滴加至培养皿盖的上方,缓慢翻转培养皿盖,孵育48-72小时后收集培养液获得干细胞微球;所述悬液中细胞浓度为20000 - 50000个细胞/30~50μL。
5.如权利要求4所述3D干细胞微球胶囊的制备方法,其特征在于,所述干细胞悬液的制备方式如下:
将生长至80%-90%的贴壁培养的干细胞用加入胰酶消化0.8~1.2分钟,终止消化后,收集至10~20mL离心管中,1000~1500rpm离心4~6分钟获得干细胞沉淀,向干细胞沉淀中加入培养基重悬后计数;培养液接种至培养皿盖的剂量为24000~26000个细胞/30~40μL。
6.权利要求1-2任一项所述3D干细胞微球胶囊在制备干细胞移植药物中的应用。
7.如权利要求6所述3D干细胞微球胶囊在制备干细胞移植药物中的应用,其特征在于,所述药物中,3D干细胞微球胶囊作为唯一活性成分,所述药物中还包括药学上所必需的载体。
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