[发明专利]一种真菌毒素检测探针及试剂盒、一种真菌毒素的检测方法

说明书

本发明提供了一种真菌毒素检测探针及试剂盒、一种真菌毒素的检测方法，属于真菌毒素检测技术领域。本发明提供的真菌毒素检测探针包括核‑壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料和与负载于所述核‑壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料表面的真菌毒素抗体。本发明利用Fe₃O₄磁性纳米颗粒作为内核，其对外部磁场的强磁响应性，能够赋予探针良好的磁分离特性，利用磁分离技术，可以省略复杂的样品预处理方法，快速实现待测样品的浓缩，避免样品损失，从而提高检测灵敏度，减少分析时间。本发明在内核表面包裹两层水溶性聚合物，每层水溶性聚合物表面分别负载有羧基化量子点，能够使探针在复杂样品中具有良好的稳定性以及生物相容性。

技术领域

本发明涉及真菌毒素检测技术领域，特别涉及一种真菌毒素检测探针及试剂盒、一种真菌毒素的检测方法。

背景技术

真菌毒素，如黄曲霉毒素B1(AFB1)、伏马毒素B1(FB1)和赭曲霉毒素A(OTA)，是由丝状真菌产生的毒性次级代谢产物，对全球农业和人类健康构成很大威胁。鉴于其出色的化学稳定性、热稳定性和低分子量(300～700Da)，这些真菌毒素可以集中在植物和动物体内，并很容易通过食物链(如果汁、肉类和牛奶)进入人体，引起严重的疾病，包括肝脏损伤、肾功能衰竭和癌症。更糟糕的是，多种真菌毒素共存于受污染的食品中是一种常见的现象，因为各种真菌在生长或产生毒素时有相同的生态条件。据粮食及农业组织(FAO)统计，全球超过25％的粮食作物被真菌毒素污染，其中高达91.4％的样品被共同污染。因此，人们强烈要求采用一种简单的方法，对真实食品中的多种真菌毒素进行超灵敏的同步检测。

免疫层析检测因其快速、低成本、便携、操作方便等突出优点，已成为一种成熟而强大的护理点检测工具。此外，免疫层析检测系统在多重检测方面也显示出巨大的潜力。以前的研究表明，在硝酸纤维素膜上构建多条平行测试线或点阵，可以在一个ICA条中同时识别多个目标。传统免疫层析检测方法的主要障碍是低灵敏度和有限的定量能力，因为利用比色的纳米标记(主要是金纳米粒子)作为信号标签。最近，一类荧光标签，如荧光染料、时间分辨荧光纳米粒子、上转换纳米材料和量子点，已被整合到免疫层析检测系统中，以提高其灵敏度和定量能力。

然而，对于食品中真菌毒素的检测时，复杂的食品成分容易影响荧光标签的胶体稳定性，同时为避免真实食品的基质效应，需要将样品稀释或进行复杂的预处理(如提取、纯化、洗涤、离心)，这会导致检测灵敏度的降低。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种真菌毒素检测探针及试剂盒、一种真菌毒素的检测方法，本发明提供的真菌毒素检测探针用于真菌毒素检测时，稳定性高，检测灵敏度高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种真菌毒素检测探针，包括核-壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料和与负载于所述核-壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料表面的真菌毒素抗体；

所述真菌毒素抗体为黄曲霉毒素B1抗体、赭曲霉毒素A抗体和伏马毒素B1抗体中的一种或几种；

所述核-壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料，包括Fe₃O₄磁性纳米颗粒内核和依次包裹在所述内核表面的两层水溶性聚合物，每层水溶性聚合物表面分别负载有羧基化量子点。

优选的，所述水溶性聚合物为PEI，所述PEI的数均分子量为5000～80000。

优选的，所述羧基化量子点为CdSe/ZnS量子点，所述CdSe/ZnS量子点表面修饰有3-巯基丙酸；所述CdSe/ZnS量子点以CdSe为核心，ZnS为壳层。

优选的，所述Fe₃O₄磁性纳米颗粒内核的粒径为80～600nm。

优选的，所述核-壳三维结构的磁核多层量子点复合纳米材料的制备方法，包括以下步骤：