[发明专利]一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液及其应用

权利要求书

1.一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液，其特征在于，在M16培养液中添加伴刀豆球蛋白A，通过调节皮质张力恢复冷冻卵母细胞机械特性从而提高冷冻卵母细胞体外培育质量，所述伴刀豆球蛋白A的添加浓度为10μg/ml。

2.一种利用权利要求1所述培养液提高冷冻卵母细胞体外培育质量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、采集GV期卵母细胞并置于M2液滴中备用；

S2、将卵母细胞转移至平衡液中30秒，随后转移至玻璃化冷冻液中20-30秒，然后迅速将卵母细胞置于载杆前端，投入液氮；

S3、解冻时，将S2所述载杆迅速从液氮中取出，置于含0.5M蔗糖的PBS中作用5min，然后用M2液清洗三遍后备用；

S4、将S3获得的卵母细胞放入所述提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液中，覆盖上石蜡油于培养箱中进行体外成熟培养。

3.根据权利要求2所述提高冷冻卵母细胞体外培育质量的方法，其特征在于，所述平衡液为含10% DMSO和10% EG的PBS液。

4.根据权利要求2所述提高冷冻卵母细胞体外培育质量的方法，其特征在于，所述玻璃化冷冻液为含15% EG、15%DMSO、0.5M蔗糖、30%Ficoll的PBS液。