[发明专利]金刚烷尾链脂质及其在细胞转染中的应用

权利要求书

1.金刚烷尾链脂质，其化学结构可由通式(I)表示：

其中，

R¹选自p代表0-4的整数，q代表1-3的整数，r代表1-2的整数，R⁴代表C1-4的烷基、C1-3的羟烷基、苯基或苄基。

R²选自中的任意一种，其中u代表1-17的整数，优选3-10的整数；

2.根据权利要求1所述的金刚烷尾链脂质，其特征在于p＝0，2或3，q＝1或2，r＝1，R⁴代表甲基、羟乙基；R²选自u＝5-8的整数。

3.权利要求1或2中通式I所示金刚烷尾链脂质的合成方法，其合成路线如下：

4.权利要求1或2所述的金刚烷尾链脂质在制备包载核酸药物的脂质纳米粒中的应用。

5.一种包载核酸药物的脂质纳米粒，其特征在于含有权利要求1所述的的金刚烷尾链脂质、可离子化脂质、中性磷脂、胆固醇和聚乙二醇化脂质，金刚烷尾链脂质：可离子化脂质：中性磷脂：胆固醇：聚乙二醇化脂质的摩尔比为10～30:10～30:10～30:30～60:0.5～10，优选15～20:15～20:10～20:40～60:0.5～2.5。

6.根据权利要求5所述的包载核酸药物的脂质纳米粒，其特征在于所述的可离子化脂质是一类头基含有一个或多个可电离氨基基团，尾链为一条或多条长度为C₆-C₂₀的饱和或不饱和烷烃链的脂质材料，其能够在酸性环境下质子化带有正电并与核酸药物通过静电作用结合，如已上市的DLin-KC2-DMA、DLIN-MC3-DMA、ALC-0315和SM102等。

7.根据权利要求5所述的包载核酸药物的脂质纳米粒，其特征在于所述的中性磷脂选自1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、大豆磷脂、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1-硬脂酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂、二芥酰基卵磷脂、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、二棕榈酰基卵磷脂中的一种或多种，优选DOPE。

8.根据权利要求5所述的包载核酸药物的脂质纳米粒，其特征在于所述的聚乙二醇化脂质，其尾链包括但不限于长度为C₆-C₂₀的饱和或不饱和烷烃链，优选1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇2000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、胆固醇-聚乙二醇2000。

9.根据权利要求5所述的包载核酸药物的脂质纳米粒，其特征在于所述的核酸药物选自pDNA、siRNA、shRNA、microRNA或mRNA，优选pDNA；其中，脂质纳米粒含有的可离子化脂质和核酸药物的氮磷比为1:1～30:1，优选3:1～8:1。

10.权利要求5-9中任一项所述的脂质纳米粒在pDNA转染、siRNA基因沉默、mRNA疫苗或CRISPR/Cas9基因编辑中的应用；优选在转染原代免疫细胞或肿瘤细胞中的应用，其中原代免疫细胞选自T细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、树突细胞等中的任意一种，肿瘤细胞选自乳腺癌MCF-7细胞、胰腺癌PANC-1细胞、肝癌HepG2细胞、肺癌A549细胞等中的任意一种。