[发明专利]一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法

权利要求书

1.一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)对照品溶液制备：取特征性成分水合氧化前胡素适量，精密称定，加醇试剂溶解，得对照品溶液；

(2)供试品溶液制备：取供试品药材，精密称定，加醇试剂溶解，得供试品溶液；

(3)测定：采用超高效液相色谱联用四极杆飞行时间质谱分别采集所述对照品溶液及所述供试品溶液的总离子流图，并分别提取其一级质谱图和/或二级质谱图；

(4)结果判定：若以质荷比(m/z)305.1021提取的供试品溶液的一级质谱图未出现与以相同质荷比提取的对照品溶液的一级质谱图对应的色谱峰，则所述供试品为枳壳正品；

反之，若以质荷比(m/z)305.1021提取的供试品溶液的一级质谱图出现与以相同质荷比提取的对照品溶液的一级质谱图对应的色谱峰，则若以质荷比(m/z)203.0345及147.0437提取的供试品溶液的二级质谱图未出现与以相同质荷比提取的对照品溶液的二级质谱图分别对应的色谱峰，则所述供试品为枳壳正品；

反之，若以质荷比(m/z)203.0345及147.0437提取的供试品溶液的二级质谱图出现与以相同质荷比提取的对照品溶液的二级质谱图分别对应的色谱峰，则所述供试品为香园掺伪。

2.如权利要求1所述的一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述特征性成分的筛选过程是采用UPLC-Q-TOF高分辨质谱法采集MS/MS质谱数据，导入Agilent MPP软件进行PCA和多元判别分析，建立枳壳、香圆、柚的判别模型，筛选组间差异性成分；共得到香圆的特有成分53个；选取经数据库检索质谱数据参数匹配鉴定的9个化合物进行筛选，并结合对照品质谱图验证发现水合氧化前胡素能有效的对香园和枳壳进行区分，为香圆特有成分，据此建立了质谱筛查方法。

3.如权利要求1所述的一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述醇试剂为甲醇；加所述甲醇制成每1ml含2μg的溶液，即得所述对照品溶液。

4.如权利要求1所述的一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述醇试剂为甲醇；进行溶解时，以0.1g中药材计，所述甲醇的添加量为25ml，并采用超声处理30min。

5.如权利要求1所述的一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，分别精密吸取所述对照品溶液2μl及所述供试品溶液1～2μl，注入液相色谱-质谱联用仪测定，记录一级质谱图和/或二级质谱图。

6.如权利要求1所述的一种基于高分辨质谱技术区分中药枳壳与香园的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述超高效液相色谱采用如下条件：

色谱条件：色谱柱：Agilent SB C18(100mm×2.1mm，1.8μm)色谱柱；柱温：30℃；流速：0.4ml/min；采用二元梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸水溶液；以所述流动相的总体积为100％计，在第0～7min，所述流动相A的体积由15％递增为25％，所述流动相B的体积由85％递减为75％；在第7～8min，所述流动相A的体积由25％递增为40％，所述流动相B的体积由75％递减为60％；在第8～10min，所述流动相A的体积由40％递增为45％，所述流动相B的体积由60％递减为55％；在第10～13min，所述流动相A的体积由45％递增为60％，所述流动相B的体积由55％递减为40％；在第13～15min，所述流动相A的体积由60％递减为15％，所述流动相B的体积由40％递增为85％。