[发明专利]肝特异性的基因编辑纳米药物及其制备方法和应用

权利要求书

1.肝特异性的基因编辑纳米药物，其特征在于，包括：磁性纳米颗粒、肝靶向配体物和肝特异性基因编辑质粒；

所述肝靶向配体物包裹在所述磁性纳米颗粒上；所述磁性纳米颗粒表面带正电荷；所述肝特异性基因编辑质粒通过静电作用与所述带正电纳米颗粒自组装，得到肝特异性的基因编辑纳米药物。

2.根据权利要求1所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述磁性纳米颗粒选自粒径为2nm-100nm疏水性超顺磁纳米颗粒或/和粒径为2nm-100nm亲水性超顺磁纳米颗粒。

3.根据权利要求1所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述肝靶向配体物包括肝靶向配体和阳离子聚合物；

所述肝靶向配体和所述阳离子聚合物通过化学键合得到肝靶向配体物。

4.根据权利要求3所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述肝靶向配体选自半乳糖、N-乙酰氨基半乳糖、去唾液酸糖蛋白、HBV前S1肽、乳糖、乳糖基去甲斑蝥素、甘草次酸、大豆衍生大豆甾醇葡糖苷等可靶向肝实质细胞的分子中的一种或多种；所述阳离子聚合物选自聚乙烯亚胺、氟修饰聚乙烯亚胺F-PEI、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、聚赖氨酸、壳聚糖中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述肝靶向配体物选自半乳糖-聚乙烯亚胺、半乳糖-氟修饰聚乙烯亚胺Gal-F-PEI、N-乙酰氨基半乳糖-氟修饰聚乙烯亚胺，去唾液酸糖蛋白-氟修饰聚乙烯亚胺、HBV前S1肽-氟修饰聚乙烯亚胺、乳糖-氟修饰聚乙烯亚胺、乳糖基去甲斑蝥素-氟修饰聚乙烯亚胺、甘草次酸-聚乙烯亚胺、甘草次酸-氟修饰聚乙烯亚胺、大豆衍生大豆甾醇葡糖苷-氟修饰聚乙烯亚胺、半乳糖-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、N-乙酰氨基半乳糖-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、去唾液酸糖蛋白-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、HBV前S1肽-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、乳糖-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、乳糖基去甲斑蝥素-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、大豆衍生大豆甾醇葡糖苷-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、半乳糖-聚赖氨酸、N-乙酰氨基半乳糖-聚赖氨酸、去唾液酸糖蛋白-聚赖氨酸、HBV前S1肽-磷脂酰乙醇胺-聚赖氨酸、乳糖-聚赖氨酸、乳糖基去甲斑蝥素-磷脂酰乙醇胺-聚赖氨酸和大豆衍生大豆甾醇葡糖苷-聚赖氨酸中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述半乳糖-氟修饰聚乙烯亚胺Gal-F-PEI的制备方法包括：

步骤一、将支化PEI与3-(1H,1H,5H-八氟戊氧基)-1,2-氧化丙烯反应，合成氟修饰聚乙烯亚胺F-PEI；

步骤二、将活化后的乳糖酸与所述氟修饰聚乙烯亚胺F-PEI混合反应，制得半乳糖-氟修饰聚乙烯亚胺Gal-F-PEI。

7.根据权利要求1所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述肝特异性基因编辑质粒包括肝特异性启动子和基因编辑系统；所述基因编辑系统可对肝炎病毒基因组进行切割编辑，从而抑制所述肝炎病毒在肝细胞中的复制。

8.根据权利要求1所述的基因编辑纳米药物，其特征在于，所述肝特异性启动子选自一种肝特异性启动子与肝特异性增强子组合的嵌合型启动子，选自载脂蛋白基因的增强子ApoE.HCR与人类α1-抗胰蛋酶启动子组合的嵌合型启动子ApoE.HCR.hAAT、人乙型肝炎病毒增强子II(EII)与白蛋白基因启动子组合的嵌合型启动子EII-Palb、人乙型肝炎病毒增强子II(EII)与血液结合素基因启动子组合的嵌合型启动子EII-Phpx中的一种或多种；所述基因编辑系统选自CRISPR/Cas9基因编辑系统、Cas12基因编辑系统、Cas13基因编辑系统、巨型核酸酶基因编辑系统、锌指核酸酶ZFNs基因编辑系统、转录激活样效应因子核酸酶TALEN基因编辑系统中的一种或多种。