[发明专利]一种小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3及其构建方法和应用

说明书

本发明公开了一种小鼠肺癌脑转移细胞LLC‑BMT3及其构建方法和应用。本发明所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC‑BMT3于2022年1月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C202228，保藏地址为中国武汉大学。所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC‑BMT3的脑转移发生率高，易于观察，不仅适于构建肺癌脑转移小鼠模型，用于筛选肺癌脑转移的分子标志物，鉴定肺癌脑转移的分子靶点，筛选或评估脑转移性肺癌的治疗药物，还能用于免疫健全小鼠的肺癌脑转移造模，开展肺癌细胞免疫逃逸及脑免疫微环境等相关研究，鉴定免疫治疗新靶点，评估免疫治疗效果，评估药物在改善免疫微环境中的效果等。

技术领域

本发明属于生物技术领域。更具体地，涉及一种小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3及其构建方法和应用。

背景技术

脑转移瘤是指中枢神经系统外的组织肿瘤细胞经血液循环系统进入颅内浸润脑组织形成的转移性肿瘤，为恶性肿瘤的一种晚期表现。脑肿瘤患者中，脑转移瘤的数量大约是原发性脑肿瘤的10倍，是成年人最常见的颅内肿瘤。脑转移瘤的发生常意味着不良的预后，未治疗的患者中位生存期仅为1～2个月，经治疗后延长为4～5个月，患者死因多为脑水肿、颅内高压、脑疝、脑出血。临床上脑转移瘤的治疗方法主要为外科手术、全脑放射治疗、立体定向放射治疗以及化疗等，但总体来说治疗效果欠佳。而脑转移瘤的原发病灶以肺癌最为多见(40％～50％)，因此，对肺癌脑转移机制的探索有着重要意义。

建立肺癌脑转移实验动物模型是进行肺癌脑转移机制研究以及药物筛选的基础。目前，国内外学者多采用在左心室、颈动脉、尾动脉、尾静脉等部位注射肿瘤细胞构建肿瘤转移模型，但由于血脑屏障的存在以及脑部功能和结构的特殊性，建立稳定的脑转移实验动物模型十分困难，关于成功构建稳定的肺癌脑转移动物模型的报道较少，且脑转移发生率也不高。例如，中国专利《一种高潜能脑转移中国人肺腺癌细胞株中》，通过取56岁女性肺腺癌患者十次化疗，放疗一次后产生的胸、腹水为细胞原代培养的材料，经培养获得人肺腺癌脑转移细胞株Yang2-脑M，通过裸鼠左心室种植试验后，分离脑转移灶经过三次筛选，获得脑转移发生率为60％的人肺腺癌脑转移亚株。此外，此方法虽成功获得了人肺腺癌脑转移亚株，但其只能应用于免疫缺陷裸鼠的肺癌脑转移模型构建，此种小鼠模型由于T淋巴细胞等免疫缺陷，无法开展肿瘤免疫逃逸及相关抗肿瘤药物的研究。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中的肺癌脑转移细胞株脑转移发生率低、只能应用于免疫缺陷小鼠、筛选和示踪效果差等缺陷和不足，提供一种能应用于免疫健全小鼠且脑转移发生率高的小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3及其构建方法和应用。

本发明的第一个目的是提供一种小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3。

本发明的第二个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3的构建方法。

本发明的第三个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在构建肺癌脑转移动物模型中的应用。

本发明的第四个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在肺癌脑转移分子标志物筛选和分子靶点鉴定中的应用。

本发明的第五个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在筛选治疗脑转移性的肺癌的药物中的应用。

本发明的第六个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在构建肿瘤免疫逃逸小鼠模型中的应用。

本发明的第七个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在构建肿瘤耐药模型中的应用。

本发明的第八个目的是提供所述小鼠肺癌脑转移细胞LLC-BMT3在开发肺癌脑转移风险评估检测试剂盒中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：