[发明专利]miR-32-5p在制备提高肿瘤细胞对双氢青蒿素敏感性的药物中的应用

说明书

本发明公开了miR‑32‑5p在制备提高肿瘤细胞对双氢青蒿素敏感性的药物中的应用，本发明经实验研究发现，miR‑32‑5p能够提高神经母细胞瘤细胞对双氢青蒿素的敏感性，进而增强治疗效果，并且基于miR‑32‑5p的上述功能，可筛选能够提高双氢青蒿素敏感性的潜在物质，本发明所提供核酸序列作为一种新型小核酸类的抗肿瘤药物，能增强神经母细胞瘤对双氢青蒿素的敏感性，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地，涉及miR-32-5p在制备提高肿瘤细胞对双氢青蒿素敏感性的药物中的应用。

背景技术

神经母细胞瘤(Neuroblastoma，NB)是一种婴幼儿时期最常见的颅外实体性恶性肿瘤，由外周交感神经组织的前体细胞发展而来，超过50%的神经母细胞瘤发生于2岁以内的婴幼儿，占儿童癌症死亡率的15%(Park, J. R., Eggert, A. Caron, H.Neuroblastoma: Biology, Prognosis, and Treatment. Hematology/Oncology Clinicsof North America. 2008 24, 65-86.；Irwin MS, Park JR. Neuroblastoma: paradigmfor precision medicine. Pediatric Clinics of North America. 2015 Feb;62(1):225-256.)，神经母细胞瘤具有异质性高、生物学行为复杂、分子特征多样等特点，疾病转移风险高，原发部位相对隐匿，早期诊断和检出难度高。目前，针对神经母细胞瘤的治疗手段多样，国内外普遍采用手术、化疗、放疗、免疫治疗等治疗手段，但是由于神经母细胞瘤的早期诊断困难，对其治疗效果一直并不理想，化疗作为神经母细胞瘤的一种重要的治疗方式，药物耐药性是一直以来导致化疗失败的重要原因。

双氢青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)由青蒿素经四氢硼钠还原所得，也是青蒿素类药物在生物体内的活性代谢产物。由于其吸收好、代谢和排泄迅速、安全低毒等性能，成为众多医学领域研究的热点。双氢青蒿素对肿瘤细胞具有直接细胞毒作用，并能诱导肿瘤细胞发生凋亡(KUWANO K. Involvement of epithelial cell apoptosis ininterstitial lung diseases[J]. Intern Med, 2008, 47 (5) :345–353.)。与正常细胞的细胞质相比，肿瘤细胞中具有更多的游离铁离子，这也是双氢青蒿素能够选择性杀伤肿瘤细胞的关键因素，双氢青蒿素内部含有过氧桥结构，在遇到亚铁离子时桥结构断裂产生大量以碳为中心的自由基，而且活性氧自由基水平也会大幅度提高，两种自由基含量的持续增加会对DNA造成不可修复的损伤，使得DNA双链破碎化，导致肿瘤细胞死亡，双氢青蒿素诱导肿瘤细胞发生凋亡包括参与内质网应激(Endoplasmic reticulum stress)、线粒体凋亡以及死亡受体(death receptor)途径，且每一条通路都不是单独的，而是共同对肿瘤细胞凋亡发挥作用，但是，双氢青蒿素单独使用时效果不佳。

鉴于此，本发明经实验研究发现，miR-32-5p能够提高神经母细胞瘤细胞对双氢青蒿素的敏感性，进而增强治疗效果，并且基于miR-32-5p的上述功能，可筛选能够提高双氢青蒿素敏感性的潜在物质。目前，尚未有文献报道miR-32-5p在用作双氢青蒿素药物增敏剂中的应用。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供miR-32-5p在制备提高肿瘤细胞对双氢青蒿素敏感性的药物中的应用，所述miR-32-5p能够显著增加神经母细胞瘤细胞对双氢青蒿素的敏感性，此外，所述miR-32-5p通过靶向VPS4B提高双氢青蒿素在体内的敏感性，且miR-32-5p和双氢青蒿素联合应用对神经母细胞瘤细胞的迁移和侵袭具有协同抑制的效果，进一步的体内实验研究证明了miR-32-5p和双氢青蒿素联合具有联合抑制神经母细胞瘤转移的作用。

本发明的上述目的通过以下技术方案得以实现：