[发明专利]一种治疗肿瘤的靶点及其应用、肿瘤治疗制剂

说明书

本发明公开了一种治疗肿瘤的靶点及其应用、肿瘤治疗制剂。通过一系列研究发现，鼻咽癌、宫颈癌、肺癌细胞中PRMT5与CD38相互作用，PRMT5使CD38蛋白发生精氨酸甲基化，影响CD38自身酶活性。具体是CD38蛋白第58位氨基酸发生精氨酸甲基化。体内和体外实验证实，CD38蛋白第58位精氨酸变为甘氨酸的突变体进入肿瘤细胞，使PRMT5无法使CD38蛋白第58位精氨酸发生甲基化，抑制CD38自身酶活性，进而通过影响NAD‑SIRT1‑p53轴促进肿瘤细胞的增殖以及体内致瘤性，达到治疗肿瘤的效果。此抗肿瘤CD38定点靶点作用明显，无明显的毒副作用。

技术领域

本发明属于抗肿瘤药物研发与治疗技术领域，具体涉及一种位于CD38蛋白上的抗肿瘤靶点及其应用和肿瘤治疗制剂。

背景技术

CD38是一个定位于膜上的单链跨膜糖蛋白、多功能的膜分子。CD38是T细胞活化的标志分子；可以作为一个受体分子，与其配体或单克隆抗体结合产生多种生物学效应；具有粘附分子特性，在淋巴细胞再循环及淋巴细胞归巢中发挥一定的作用；介导跨膜信号传递。起初CD38被认为是骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病(CLL)诊断和预后判断的一个可靠的生物标志分子，FDA已批准两种CD38抗体(Daratumumab和Isatuximab)用于治疗多发性骨髓瘤。最近，近年来，随着研究的深入，发现CD38在实体瘤的发生、发展中也扮演着重要角色，如鼻咽癌、肺癌、宫颈癌、脑胶质瘤等多种实体瘤中都存在异常表达。研究者发现了一种新机制，在对PD-L1抗体有反应的荷瘤小鼠，肿瘤细胞CD38表达上调，导致小鼠产生免疫耐受和PD-L1的抵抗。因此PD-L1联合CD38抗体治疗能否在临床前或临床环境中克服PD-L1耐药性还需要进一步探讨。虽有研究开始联合PD-L1和CD38抗体治疗的肺癌患者的临床结果，但是结果并不令人满意。因此，CD38在实体瘤中作用的内在机制值得进一步探索。迄今为止，尚无报道关于CD38在实体瘤中作用的内在机制，需要进一步探索CD38在实体瘤作为抗肿瘤治疗靶点。

PRMT5属于蛋白质精氨酸甲基化转移酶家族的一种，该家族共有9个。蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)可以催化甲基从辅因子S-腺苷-1-蛋氨酸(AdoMet)移至到多种底物，包括组蛋白和转录因子。PRMT5作为II型中最主要酶不仅可以让组蛋白对称地二甲基化还可以对称地二甲基化非组蛋白，研究发现在淋巴瘤细胞中，PRMT5是BCL6的新型相互作用蛋白分子，用PRMT5抑制剂处理后，BCL6的许多靶基因被抑制，PRMT5和BCL6抑制剂的组合是一种潜在的肿瘤治疗策略。因此PRMT5也可作为一个潜在的抗肿瘤治疗靶点。

CD38和PRMT5均是潜在的肿瘤的干预靶点，但是这两个蛋白之间相互作用及其生物意义至今未见报道。本发明采用免疫共沉淀-高通量质谱分析技术(靶向蛋白质组学技术)筛选鼻咽癌细胞、宫颈癌CD38的相互作用蛋白，发现PRMT5是CD38的互做蛋白，免疫共沉淀实验验证证实PRMT5是鼻咽癌、宫颈癌、肺癌细胞CD38的互做蛋白，在HEK293细胞中外源性PRMT5与CD38也存在相互作用，激光共聚焦实验证实PRMT5与CD38在细胞膜处发生共定位。蛋白质互作是细胞生化反应网络的一个主要组成部分，参与调节细胞各种生理功能，如蛋白质互作通过调控蛋白质修饰、稳定性和亚细胞定位等调控细胞的功能及其信号传导。研究表明，蛋白质互作不仅与肿瘤密切相关，而且是重要的药物靶点，调控蛋白质修饰的多肽有望成为新的抗癌药物，因此，基于PRMT5与CD38是重要的肿瘤基因以及两者相互作用，阻断PRMT5与CD38相互作用很可能研发出新的抗肿瘤药物。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种治疗肿瘤的新靶点，为CD38蛋白的第58位氨基酸。该位点氨基酸为精氨酸。

进一步地，所述的肿瘤包括鼻咽癌、宫颈癌和肺癌。

本发明的第二个目的是提供突变CD38蛋白的第58位氨基酸，或者阻断CD38蛋白的第58位氨基酸甲基化的试剂在制备肿瘤治疗制剂中的应用。

进一步地，所述的肿瘤包括鼻咽癌、宫颈癌和肺癌。