[发明专利]基于臧红T荧光猝灭法测定血清过氧化氢酶活度的方法

权利要求书

1.基于臧红T荧光猝灭法测定血清过氧化氢酶活度的方法，其特征在于，该方法基于H₂O₂/Fe²⁺作用下的臧红T荧光猝灭体系实现过氧化氢酶活度测定，荧光试剂臧红T于575 nm处有最大发射波长，Fe²⁺催化H₂O₂氧化臧红T导致其荧光猝灭，过氧化氢酶分解H₂O₂引起荧光回位，通过过氧化氢酶加入前后荧光猝灭值△F获取过氧化氢酶的活度，其中，△F=0.7527+1807E(U/mL)，r=0.9980，最低检测限达到3.81×10^-5 U/mL。

2.如权利要求1所述的基于臧红T荧光猝灭法测定血清过氧化氢酶活度的方法，其特征在于，包括如下步骤：

取人体血清25~100 μL置于容量瓶中，加入1.00 mL H₂O₂底液，恒温30 ^oC下反应10 min后，立即加入0.80 mL Fe²⁺、3.00 mL 臧红T，室温反应15 min后定容，臧红T空白作参比，在1cm吸收池中测定575 nm发射波长处荧光强度F，同步测定酶空白体系F₀，过氧化氢酶活度E由△F确定，其中，△F = F- F₀。

3.如权利要求2所述的基于臧红T荧光猝灭法测定血清过氧化氢酶活度的方法，其特征在于，酶空白体系F₀测定时，即取人体血清25~100 μL置于容量瓶中，加0.80 mL Fe²⁺溶液,振荡0.5min，使酶失活，再加入1.00 mL的H₂O₂底液，3.00 mL 臧红T，室温反应15 min后定容，完成F₀测定。