[发明专利]一种绿洲1号菌草的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种绿洲1号菌草的组培快繁方法，包括培养材料选取，外植体处理及消毒，启动培养，增殖培养，生根培养和驯化移栽。本发明属于菌草生产技术领域，具体是指一种对绿洲1号菌草对外植体灭菌、茎段腋芽诱导及增殖、生根及炼苗移栽方案进行优化，为绿洲1号种苗的快繁和规模化生产提供技术支持的绿洲1号菌草的组培快繁方法。

技术领域

本发明属于菌草生产技术领域，具体是指一种绿洲1号菌草的组培快繁方法。

背景技术

绿洲1号(Arundo donax cv.LvzhouNo.1)菌草是多年生草本植物，属禾本科(Poaceae)芦竹属(Arundo)。绿洲1号是由福建农林大学菌草研究所培育，最初被用于栽培食药用菌。近些年菌草因特殊的生物学性质与丰富的价值受到国内外众多学者的关注和研究。绿洲1号菌草粗蛋白含量高、适口性好，且速生丰产，在饲料方面价值极高，是畜牧养殖青料、贮料的新宠。绿洲1号菌草耐旱涝瘠薄，具有较强的覆盖性和分蘖再生能力，可作为生物沙障、水土保持植物品种在黄土丘陵地区种植。当前，绿洲1号用作牧草精饲料或是生态植物，国内国际市场巨大。但绿洲1号属无性繁殖植物，传统繁育途径即种植种芽、压枝繁殖或扦插，存在育苗效率低、种苗供应不足、苗木质量参差不齐等诸多缺点，显然无法为绿洲1号大规模的种植提供标准化种苗。近年来，绿洲1号在我国北方地区推广还面临着外调种苗、运输及贮存费用高昂等亟需解决的问题。

目前关于绿洲1号组培苗再生途径鲜有公开报道。植物组织培养由于能保持母体的遗传特性，是种群扩繁的常用方法，也是唯一能利用较少的植物材料在短期内大量繁殖完整植株的技术，同时还具有种苗脱毒化、繁殖系数高、不受季节和环境条件限制等优势。因此将组织培养技术应用于绿洲1号的扩繁中，使其苗木产业化以解决作物紧缺问题、进行大规模推广利用则显得尤为重要。

发明内容

为了解决上述难题，本发明提供了一种对绿洲1号菌草对外植体灭菌、茎段腋芽诱导及增殖、生根及炼苗移栽方案进行优化，为绿洲1号种苗的快繁和规模化生产提供技术支持的绿洲1号菌草的组培快繁方法。

为了实现上述功能，本发明采取的技术方案如下：一种绿洲1号菌草的组培快繁方法，包括如下步骤：

(5)培养材料选取：

选取菌草绿洲1号优株，采集生长旺盛部位的嫩枝前端的带节茎段(直径0.4～0.6cm)作为培养材料；

(6)外植体处理及消毒：

将培养材料剥离表皮、去除叶片，自来水冲洗10min去掉表面污渍，用解剖刀切分成2～3cm的带节茎段，转入超净工作台，在2％NaClO(次氯酸钠溶液)中振荡消毒4-12min，用无菌水漂洗5次，每次30s，随后在无菌滤纸上吸干水分，用解剖刀切除两端0.3～0.5cm，并在茎节膨起处螺旋切割使其出现新创面，后立即用镊子接种；

(7)启动培养：

在基本培养基中均附加配备比为6-BA5.0mg/L+0.2mg/L,4-D+NAA0.2mg/L的诱导腋芽激素制成启动培养基，将经消毒处理的外植体接种于启动培养基中进行腋芽诱导；

(8)增殖培养：

将启动培养中生长健壮、长势一致的无菌单芽(切割时带少量基部组织)转接到以MS为基本培养基含有激素的增殖培养基中；

(5)生根培养：

选取增殖培养中长势健壮的丛生芽(3～5cm)，转接到添加添加剂的MS生根培养基中进行培养，培养基中添加30g/L蔗糖、6.5g/L琼脂粉，将pH值调至6.0，加入激素后配制分装，在121℃下高压蒸汽灭菌20min，接种后放置于培养箱中，温度:(25±3)℃，光照强度:2500～3000lx，光周期12h/d，相对空气湿度50％～60％；

(6)驯化移栽：