[发明专利]一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法在审
| 申请号： | 202210060736.2 | 申请日： | 2022-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN114231468A | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 徐晶;王先志;姚武 | 申请（专利权）人： | 同济大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200092 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 巴氏生孢八叠 球菌 培养 方法 | ||
1.一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将巴氏生孢八叠球菌在固体活化培养基中进行活化，得到活化菌种；
(2)将步骤(1)得到的活化菌种接种至液体种子培养基中进行培养，从中选取单位脲酶活性高于5.0U/ml/OD600的菌液作为种子液；
(3)将步骤(2)的种子液接种至液体芽孢培养基中发酵培养，得到巴氏生孢八叠球菌。
2.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(1)中，固体活化培养基配方如下：
以1L水计，大豆蛋白胨3-8g、酪蛋白12-16g、尿素17-22g、琼脂15-20g，pH为8.5-9.5。
3.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(1)中，活化过程具体为挑取低温保存的巴氏生孢八叠球菌菌苔，通过平板划线方式划线后培养。
4.根据权利要求3所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，培养过程中，培养温度为室温，培养时间为36-72h。
5.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(2)中，液体种子培养基配方如下：
以1L水计，大豆蛋白胨3-8g、酪蛋白12-16g、尿素17-22g，pH为8.5-9.5。
6.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(2)中，培养过程中，培养转速为120-170rpm/min；培养温度为27-35℃；培养时间为24-48h。
7.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(3)中，液体芽孢培养基配方如下：
S1：以1L水计，蛋白胨3-6g、牛肉膏2-4.5g、KCl 0.8-1.5g、CaCl2 0.05-0.2g；
S2：以1L水计，MgSO4 9-14g、MnSO4·H2O 0.5-2.0g、FeSO4·7H2O 0.01-0.07g，(NH4)2SO460-150g；
S1与S2的体积比为87：13–93：7，pH为8.5-9.5。
8.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(3)中，种子液与液体芽孢培养基的体积比为1-2：100。
9.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(3)中，发酵培养过程中，培养转速为120-170rpm/min；培养温度为27-35℃。
10.根据权利要求1所述的一种巴氏生孢八叠球菌的培养方法，其特征在于，步骤(3)中，当芽孢浓度达到108-109CFU/mL时终止培养。
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