[发明专利]一种HCG和P联合检测用试纸条、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种HCG和P联合检测用试纸条，其特征在于，包括支撑板、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜、吸水垫和样品垫，其中，所述支撑板为长条结构，位于最底部，在所述支撑板上方依次设置所述样品垫、所述玻璃纤维素膜、所述硝酸纤维素膜和所述吸水垫；所述硝酸纤维素膜上依次设置有HCG检测线、P检测线和质控线；所述玻璃硝酸纤维素膜包含有量子点标记的HCG抗体、量子点标记的P抗体和量子点标记的鸡IgY。

2.根据权利要求1所述的HCG和P联合检测用试纸条，其特征在于，所述样品垫的顶端压住所述玻璃纤维素膜的底端并与之粘贴，所述玻璃纤维素膜的顶端压住所述硝酸纤维素膜的底端并与之粘贴，所述硝酸纤维素膜的顶端被所述吸水滤纸的底端压住并与之粘贴。

3.根据权利要求1所述的HCG和P联合检测用试纸条，其特征在于，所述HCG检测线、P检测线和质控线间隔4-6mm。

4.权利要求1-3任一所述的HCG和P联合检测用试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，制备量子点标记的HCG抗体：采用MES缓冲液稀释量子点微球颗粒，加入羧甲基纤维素钠和活化剂，活化10-20min后，加入终止剂后反应10-20min；按照HCG抗体与量子点微球质量比为1：20的比例加入抗体，经混匀和离心处理后得到量子点标记的HCG抗体；

S2，制备量子点标记的P抗体和鸡IgY抗体:按照步骤S1中同样的方法分别制备量子点标记的P抗体和鸡IgY抗体；

S3，制备包含有抗体混合物的玻璃纤维素膜：将量子点标记的HCG抗体、量子点标记的P抗体、量子点标记的鸡IgY抗体按质量比2：2:1混合后,喷涂于玻璃纤维素膜上，干燥后即得量子点标记的HCG抗体、量子点标记的P抗体、量子点标记的鸡IgY抗体混合物标记的玻璃纤维素膜；

S4，制备硝酸纤维素膜：取硝酸纤维素膜，按一定的间隔依次划分HCG检测线、P检测线和质控线，然后分别取HCG抗体、P-BSA和羊抗鸡IgY，分别喷涂到对应的HCG检测线、P检测线和质控线上，干燥后即得硝酸纤维素膜；

S5，组装试纸条：在塑料板上放置步骤S4制备的硝酸纤维素膜,将步骤S3制备的玻璃纤维素膜压在所述硝酸纤维素膜靠近检测线的一端，然后在玻璃纤维素的一端放置样品垫，硝酸纤维素膜的另一端放置吸水垫，干燥后即完成试纸条的组装过程。

5.根据权利要求4所述的HCG和P联合检测用试纸条的制备方法，其特征在于，步骤S1中，量子点微球颗粒与MES缓冲液的体积比为1：10；活化剂采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；终止剂采用β巯基乙醇和赖氨酸。

6.根据权利要求4所述的HCG和P联合检测用试纸条的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述经混匀和离心处理后得到量子点标记的HCG抗体具体包括：混匀3-3.5h后，8000-15000rpm离心15-30min，将沉淀物颗粒用封闭液重悬，室温混匀1-1.5h，之后8000-15000rpm离心15-30min，沉淀颗粒物复溶于分散液，即得量子点标记的HCG抗体。

7.根据权利要求4所述的HCG和P联合检测用试纸条的制备方法，其特征在于，步骤S4中，分别取HCG抗体、P-BSA和羊抗鸡IgY，分别喷涂到对应的HCG检测线、P检测线和质控线上，具体包括：分别取浓度均为1mg/ml的HCG抗体、P-BSA、羊抗鸡IgY，以1ul/cm，10cm/秒的速度分别喷涂到硝酸纤维膜的HCG检测线、P检测线和质控线上。

8.根据权利要求4所述的HCG和P联合检测用试纸条的制备方法，其特征在于，步骤S5中，组装过程中，所述吸水垫长度为40-45mm，所述吸水垫与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1mm；所述玻璃纤维素膜的长度为6-8mm，所述玻璃纤维素膜与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1-2mm；所述样品垫的长度为25-27mm，所述样品垫与所述玻璃纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1-2mm。