[发明专利]一种尿液样本的前处理方法、保存方法、自动化处理系统及检测方法在审
| 申请号： | 202210050595.6 | 申请日： | 2022-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN114354333A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 成晓亮;余静;周岳;张伟;郑可嘉 | 申请（专利权）人： | 江苏品生医疗科技集团有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/40 | 分类号： | G01N1/40;G01N1/42;G01N1/28;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/34;G01N30/72;G01N35/10 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 张金铭 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 尿液 样本 处理 方法 保存 自动化 系统 检测 | ||
1.一种尿液样本的保存方法，其特征在于，其包括：将经过蛋白裂解后的尿液样本进行还原烷基化处理，然后进行蛋白富集；
所述蛋白富集是采用PVDF过滤板对还原烷基化处理后的样本进行蛋白富集；
所述蛋白裂解采用的裂解液与待裂解的尿液样本的混合体积比为1:0.1～9。
2.根据权利要求1所述的尿液样本的保存方法，其特征在于，所述裂解液选自如下物质中的至少一种：尿素、硫脲、盐酸胍、三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸、苯甲基磺酰氟、十二烷基硫酸钠、脱氧胆酸钠和3-[3-(胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐；
优选地，所述裂解液选自尿素，且所述尿素在所述待裂解的尿液样本中的终浓度为1M-5M；
优选地，所述蛋白裂解液采用的稀释液选自如下物质中的至少一种：碳酸氢铵、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液、磷酸盐溶液。
3.根据权利要求1或2所述的尿液样本的保存方法，其特征在于，所述蛋白富集前，还包括对所述PVDF过滤板进行活化，活化后用所述裂解液进行平衡，然后将所述还原烷基化处理后的样本转移至平衡后的PVDF过滤板上进行蛋白富集；
优选地，所述活化采用的活化剂为醇类物质。
4.一种尿液样本的前处理方法，其特征在于，其包括：将经过蛋白裂解后的尿液样本进行还原烷基化处理，然后进行蛋白富集，富集后再进行酶解，浓缩冻干；
所述蛋白富集是采用PVDF过滤板对还原烷基化处理后的样本进行蛋白富集；
所述蛋白裂解采用的裂解液与待裂解的尿液样本的混合体积比为1:0.1～9。
5.根据权利要求4所述的尿液样本的前处理方法，其特征在于，所述酶解后还包括收集PVDF过滤板中的滤液；
优选地，所述酶解采用酶为胰蛋白酶和赖氨酸酶；
优选地，所述酶解时间为1-18h；
优选地，所述蛋白富集包括：将还原烷基化处理后的样本加入PVDF过滤板，离心后，用洗脱液清洗离心获得的样本。
6.根据权利要求4所述的尿液样本的前处理方法，其特征在于，所述裂解液选自如下物质中的至少一种：尿素、硫脲、盐酸胍、三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸、苯甲基磺酰氟、十二烷基硫酸钠、脱氧胆酸钠和3-[3-(胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐；
优选地，所述裂解液选自尿素，且所述尿素在所述待裂解的尿液样本中的终浓度为1M-5M。
7.一种尿液样本的自动化处理系统，其特征在于，其包括尿液样本储存单元、处理液供应单元、PVDF过滤板供应单元、吸样单元、蛋白收集单元和酶储存单元，且所述尿液样本储存单元、处理液供应单元、PVDF过滤板供应单元、吸样单元、蛋白收集单元和酶储存单元均电连接于控制终端实现自动化控制。
8.根据权利要求7所述的尿液样本的自动化处理系统，其特征在于，所述处理系统还包括裂解反应容器供应单元、摇床、浓缩仪和PCR板；
所述处理液供应单元包括裂解液供应单元、还原剂供应单元、烷基化试剂供应单元、终止烷基化反应试剂供应单元、活化剂供应单元、洗脱液供应单元和复溶溶剂供应单元。
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