[发明专利]一种促进不结球白菜开花的基因及其载体、重组菌和应用

说明书

本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，提供了一种促进不结球白菜开花的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种包括上述促进不结球白菜开花的基因的载体与包括上述基因的重组菌。同时，本发明还提供了一种上述促进不结球白菜开花的基因在培育早开花的转基因植株方面的应用。本发明提供的DREB2B基因能够促进不结球白菜植株提早抽薹开花，从而缩短育种周期，为培育早开花不结球白菜品种提供理论依据。

技术领域

本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，尤其涉及一种促进不结球白菜开花的基因及其载体、重组菌和应用。

背景技术

不结球白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.rosularis Tsen)是十字花科芸薹属白菜的一个变种，有着丰富的遗传资源，不同品种的开花时间存在广泛差异。

开花是植物生长发育过程中重要的转折点，也是植物由营养生长向生殖生长转化的重要标志。对于一些不结球白菜晚花品种而言，其花期严重影响其育种周期。在杂交育种过程中，若花期不能相遇，会导致育种失败。

据此，目前急需展开对促进不结球白菜提早开花的研究，从而为培育出早花的不结球白菜品种提供理论依据，而这对缩短不结球白菜的育种周期具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种促进不结球白菜开花的基因及其载体、重组菌和应用。

本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：

本发明首先提供一种促进不结球白菜开花的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。

作为本发明的优选方式之一，所述基因的克隆步骤如下：提取不结球白菜总RNA并反转录成cDNA；设计特异性扩增引物DREB2B-F和DREB2B-R；以cDNA为模板进行PCR扩增，得目的基因DREB2B；其中，特异性扩增引物DREB2B-F和DREB2B-R的核苷酸序列分别如SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3所示。

本发明还提供一种上述促进不结球白菜开花的基因在培育早开花的转基因植株方面的应用。

本发明还提供一种重组载体，所述重组载体包括上述促进不结球白菜开花的基因。

作为本发明的优选方式之一，所述重组载体具体为pCambia1305-35S-BrDREB2B-nFLAG-cMYC。

作为本发明的优选方式之一，所述重组载体的构建方法如下：将促进不结球白菜开花的基因DREB2B插入到载体pCambia1305-35S-nFLAG-cMYC的酶切位点，再通过连接酶连接。

作为本发明的优选方式之一，所述载体pCambia1305-35S-nFLAG-cMYC的酶切位点是BamHI和XbaI。

本发明还提供一种重组菌，所述重组菌包括上述促进不结球白菜开花的基因。

作为本发明的优选方式之一，所述重组菌的构建方法如下：将促进不结球白菜开花的基因构建的重组载体pCambia1305-35S-BrDREB2B-nFLAG-cMYC导入菌体。

本发明相比现有技术的优点在于：本发明提供的DREB2B基因能够促进不结球白菜植株提早抽薹开花，从而缩短育种周期，为培育早开花不结球白菜品种提供理论依据。

附图说明

图1是实施例4中筛选出的野生型植株与转基因植株在培养皿中的培养状态图(图1a为野生型对照植株，图1b为抗性板上筛选得到的转基因植株)；

图2是实施例4中拟南芥植物的野生型和过表达转基因系中BrDREB2B基因表达量对比图；