[发明专利]茶黄素在制备抗猪链球菌药物中的应用

说明书

本发明属于兽药技术领域，公开了茶黄素在制备抗猪链球菌药物中的应用。申请人发现，茶黄素具有抑制猪链球菌生长和杀灭猪链球菌的作用，其对猪链球菌的最小抑菌浓度为512μg/ml、最小杀菌浓度为2048μg/ml，克服了疫苗、化药、抗生素的毒副作用与食品安全隐患，在食品加工、医药、养殖业领域具有广阔的应用前景和开发价值。

技术领域

本发明属于兽药技术领域，具体涉及茶黄素在制备抗猪链球菌药物中的应用。

背景技术

猪链球菌是一种人畜共患的传染病病原菌，能引起脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎、肺炎，导致猪甚至人的感染死亡。猪链球菌病不仅对养猪业造成了重大的经济损失，而且对人类公共卫生安全构成了巨大威胁。根据细菌荚膜多糖抗原特异性的不同，猪链球菌被分为33种血清型，在众多血清型中，猪链球菌2型、7型、马链球菌兽疫亚种是经常从病死猪中分离出来的优势血清型。

控制猪链球菌病的重点是预防为主，兼以抗生素治疗。然而猪链球菌血清型众多，一种疫苗难以提供全面的保护。而随着抗生素的大量、不合理使用，导致细菌性病原的耐药性非常严重。临床实验数据显示，不同国家和地区分离的猪链球菌都出现了不同程度的耐药性。中国学者王治方临床分离了68株猪链球菌，除对头孢噻呋、头孢他啶、阿莫西林和氨苄西林敏感性较好外，对其他5类13种抗菌药物均高度耐药，且存在严重的多重耐药现象。中国学者谭美芳从临床健康猪中共采集鼻拭子标本314份，猪链球菌阳性分离率为34.08％。抗菌药物敏感性试验表明，80％以上的菌株对万古霉素、青霉素、米诺环素和氯霉素敏感，对克林霉素、四环素、克拉霉素和红霉素耐药率较高。所有的分离菌株对三种或三种以上的抗菌素都有耐药性。法国学者Marie分离的猪链球菌中，几乎所有的菌株都对青霉素G、阿莫西林、头孢噻呋、氟苯尼考、庆大霉素、杆菌肽锌敏感，耐药性最为严重的是多西环素、大环内酯类以及林可胺类抗生素。韩国学者Dong检测了本国猪体内分离到的55株猪链球菌对于临床常用的四环素、庆大霉素和壮观霉素均耐药。

目前，申请专利《茶黄素-双没食子酸酯在制备MBLs抑制剂中的医用用途》(专利号为201810802295.2)，已公开茶黄素-双没食子酸酯(分子式：C43H32O20，分子量：868.70)能够抑制B类β-内酰胺酶的活性，恢复多种β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌BAA1717的杀菌活性。具体实施方式涉及茶黄素-双没食子酸酯与头孢硝噻吩(β-内酰胺类抗生素)共同孵育时能够剂量依赖性地抑制B类β-内酰胺酶的活性，具体实施方式涉及茶黄素-双没食子酸酯与头孢硝噻吩联用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌BAA1717的最小抑菌浓度(MIC)，没有涉及最小杀菌浓度(MBC)，并且时间-杀菌实验没有说明头孢噻吩和茶黄素-双没食子酸酯分别单独使用或联合使用的药物浓度，时间-杀菌实验中头孢噻吩和茶黄素-双没食子酸酯分别单独使用或联合使用不能杀死耐甲氧西林金黄色葡萄球菌BAA1717，只说明能影响菌体的生长速度。在试验例4小鼠金黄色葡萄球菌肺炎模型治疗学研究中，头孢噻吩治疗组每只小鼠皮下注射0.325mg，茶黄素-双没食子酸酯治疗组每只皮下注射1mg，联合用药组每只小鼠同时皮下注射头孢噻吩0.325mg和茶黄素-双没食子酸酯1mg，并且12小时候重复给药，与试验例2中茶黄素-双没食子酸酯体外最小抑菌浓度0.004mg相差甚远，结果表明茶黄素-双没食子酸酯与头孢噻吩联用组显著的降低了金葡感染小鼠的死亡率，存活率在80％左右，而单独使用头孢噻吩0.325mg和茶黄素-双没食子酸酯1mg不能很好地降低死亡率。综述所述，并没有说明茶黄素-双没食子酸酯具备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌BAA1717效果，而是在抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌BAA1717的B类β-内酰胺酶的活性。

茶黄素(分子量为564，分子式：C₂₉H₂₄O₁₂)是存在于黄茶、红茶中的一种金黄色色素，是茶叶发酵的产物。目前，众多研究表明，茶黄素具有降血脂、抵抗肿瘤发生发展，调节血糖，延缓衰老等多种生物学活性，并且其作用机制涉及广泛，包括NF-κB、PI3K-Akt、AP-1等信号通路，具有多靶点、多环节、多效应等的作用特点，并且没有毒副作用。然而对茶黄素抑菌作用的研究鲜有报道。

发明内容