[发明专利]一种香菇绿霉病强抗性菌株的培育方法及其应用

说明书

本发明公开了一种香菇绿霉病强抗性菌株的培育方法，包括以下步骤：获取待选香菇菌种，进行至少一次诱导培养，每次诱导培养结束后进行抗性评价，筛选拮抗能力变化大于等于预设阈值的菌株，依据拮抗能力变化越大，菌株抗性越强的原则直至筛选出合适强抗性菌株；所述诱导培养为将上一代的香菇菌种单菌落接种于诱导培养基，培养至菌丝长满培养基为止；所述诱导培养基含有用于诱导香菇菌株提升绿霉病抗病性的去活深绿木霉发酵液；采用含0.75‑1.5％去活的深绿木霉发酵液的诱导培养基培养1‑5次，能有效提升菌株的抗性；所述香菇绿霉病强抗性菌株培育方法的应用，其可应用于防治木霉菌引起袋栽或瓶栽食用菌的病害。

技术领域

本发明属于食用菌强抗性菌株培育方法领域，更具体地，涉及一种香 菇绿霉病强抗性菌株的培育方法及其应用。

背景技术

木霉属真菌(Trichoderma spp.)是食用菌绿霉病害的主要侵染源，常见的 有绿木霉(T.cf.virensv VonArx)、长枝木霉(T.longibrachiatum Rifai)、哈茨 木霉(T.harzianum Rifai)、深绿木霉(T.atrovide Karsten)、棘孢木霉 (T.asperellumSamuels,LieckfNirenberg)等，木霉菌可直接污染培养料， 或侵染长满香菇菌丝体的菌棒，其引起的绿霉病是香菇栽培生产中最为严 重的病害，常在香菇栽培生产初期带来严重损失。

化学杀菌药剂对真菌具有杀菌作用，但食用菌和木霉菌都属于真菌， 且木霉菌是寄生在食用菌中，绝大部分化学杀菌药剂在杀灭木霉菌的同时 也会杀灭食用菌，这也是食用菌病害防治中缺少有效药剂的重要原因。目 前食用菌绿霉病防治仅有有限的几种化学药剂，如咪鲜胺锰盐、噻菌灵等， 但都是适合于床式或畦式栽培的食用菌如双孢蘑菇，对于袋栽或者瓶栽的 食用菌如香菇，其化学药剂施用方式非常不友好。

就目前来说，防治食用菌绿霉病最有效的方法是筛选抗病品种和控制 环境卫生，目前除严格控制接种和栽培环境外，尚缺乏优质的抗病品种， 而香菇中提高绿霉病抗性的方法也尚未见相关报道。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种香菇绿霉病 强抗性菌株的培育方法，其目的在于通过在培养基中添加去活的深绿木霉 发酵液，并对香菇菌株进行多次诱导培养，每次诱导培养后采用菌落侵染 法进行抗性评价，筛选拮抗能力变化大于等于20％的菌株，依据拮抗能力 变化越大，抗性越强的原则选择合适的抗病菌株，由此解决缺乏优质的抗 绿霉病品种的技术问题。

为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种香菇绿霉病强 抗性菌株的培育方法，其包括以下步骤：

获取待选香菇菌种，进行至少一次诱导培养，每次诱导培养结束后进 行抗性评价，筛选拮抗能力变化大于等于预设阈值的菌株，依据拮抗能力 变化越大，菌株抗性越强的原则直至筛选出合适强抗性菌株；

所述诱导培养具体为：

将上一代的香菇菌种单菌落接种于诱导培养基，培养至菌丝长满培养 基为止；所述诱导培养基含有用于诱导香菇菌株提升绿霉病抗病性的深绿 木霉发酵液，所述深绿木霉发酵液为去活的深绿木霉发酵产物；所述去活 的深绿木霉发酵产物为除去深绿木霉菌活细胞和孢子的发酵液。

优选地，所述香菇绿霉病强抗性菌株的培育方法，其所述去活的深绿 木霉发酵产物，按照以下制备方法获得：

在活化后的深绿木霉菌落边缘取菌种，按照菌种添加比例加入到液体 培养基中，恒温振荡暗培养预设时间，培养结束后分离过滤获取深绿木霉 发酵液，获取的深绿木霉发酵液经灭菌获得所述去活的深绿木霉发酵液。

优选地，所述香菇绿霉病强抗性菌株的培育方法，其所述去活的深绿 木霉发酵液，其菌种添加比例为每200ml液体培养基加入2-5个直径7-9mm 菌饼或相应大小的深绿木霉菌块。