[发明专利]一种基于磁珠法的高通量植物组织基因组DNA提取方法

权利要求书

1.一种DNA提取液，其特征在于，包括如下(a)或(b)所示配方：

(a)所述DNA提取液包括如下组分：NaCl，Tris-HCl，EDTA，CTAB，山梨醇和PVP；

(b)所述DNA提取液包括如下组分：NaCl，Tris-HCl，EDTA，SDS，山梨醇和PVP。

2.如权利要求1所述的DNA提取液，其特征在于，所述DNA提取液包括如下组分：1.20-1.65mol/L NaCl，0.05-0.12mol/L Tris-HCl，0.01-0.03mol/L EDTA，15.00-23.00g CTAB，3.00-6.50g山梨醇和5.00-13.00g PVP。

3.如权利要求1所述的DNA提取液，其特征在于，所述DNA提取液包括如下组分：0.50-0.85mol/L NaCl，0.02-0.07mol/L Tris-HCl，0.005-0.015mol/L EDTA，8.00-15.00gSDS，3.00-6.50g山梨醇和8.00-12.00g PVP。

4.如权利要求1所述的DNA提取液，其特征在于，还包括磁珠。

5.一种基于磁珠法的高通量植物组织基因组DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将植物组织和钢珠混合后再于超低温环境冷冻处理，之后再将植物组织进行研磨；

(2)研磨后的植物组织，与权利要求1所述的DNA提取液混匀后，水浴加热；

(3)水浴加热处理后的样品进行离心，再加入蛋白溶液，震荡、离心；

(4)离心后的上清液，放于移液工作站提取基因组DNA。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述植物组织为棉花叶片或者种子。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述超低温环境为-80℃；所述研磨条件为：于1500rpm研磨30s；

8.如权利要求6所述的方法，其特征在，所述棉花叶片与权利要求1中(a)所示的DNA提取液按照0.10g：(400-500)μL混合；

所述棉花种子与权利要求1中(b)所示的DNA提取液按照1粒：400-500μL混合；

所述水浴加热条件为：65℃水浴加热30min。

9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蛋白溶液的添加量按照所述DNA提取液体积的一半添加；

加入所述蛋白溶液之前，于4500rpm离心1min；加入所述蛋白溶液后，先于1000rpm震荡10s后再于4500rpm离心10min，最后再于4500rpm离心1min。

10.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述上清液在加入所述移液工作站时，每200μL上清液还需要加入10μL磁珠。