[发明专利]一株植物乳杆菌HL-16及其应用

说明书

本发明涉及一株植物乳杆菌HL‑16及其应用，属于微生物技术领域。所述植物乳杆菌HL‑16是从鸡粪中分离并筛选得到的，是一种乳杆菌，已进行保藏，保藏编号为CGMCC No.24035。本发明通过对植物乳杆菌HL‑16生物学特性分析显示，该菌具有耐受性好、产酸能力强、产β‑葡萄糖苷酶水平高、生长速度快等优点，可与酿酒酵母及纤维素酶进行菌酶协同发酵，应用于固态发酵中药中，发酵后的中药具有良好的抑菌性能。本发明主要使用具有自主知识产权的菌种，发酵中药，大幅度提高中药中生理活性物质的释放，显著抑制致病菌生长繁殖，从而避免有害代谢产物产生，具有促进动物生长的功能。该植物乳杆菌HL‑16，是一株优异的益生菌。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一株乳杆菌及其应用，具体涉及一株发酵特性好，耐受性好、产酸能力强、产β-葡萄糖苷酶水平高、生长速度快，适用于固态发酵中药的植物乳杆菌HL-16。

背景技术

在国家饲料禁抗、养殖减抗的双重政策下，使得畜禽养殖面临诸多问题：生长性能下降、疾病多发、养殖成本提高等。许多养殖户依然不注重对饲养条件的改善和对养殖水平的提高，“有病吃药，无病也吃药”的理念使得养殖户始终将动物健康寄希望于用药上，使得抗生素用量远远超过治疗动物疾病时所需的量，增加了饲养成本的同时，致病菌耐药性也不断增强，疾病最终难以控制，最终也导致了产品品质的降低。况且过量应用抗生素类也会危害人类的健康，过量的抗生素又随粪便、污水流入环境造成环境污染，形成一种“逆循环”。

中药作为我国的一种瑰宝，其种类多、资源丰富，更令人瞩目的是其在新型冠状病毒肺炎治疗过程发挥的重要作用。其炮制工艺历史悠久，因具有天然、绿色、治未病的养生理念而不断传承至今，日益受到市场欢迎。乳酸菌是作为一类能细菌在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性。研究发现，益生菌发酵中药可以提高有效成分含量，且益生菌通过其耐受性而定植于肠道中，以达到调节肠道微生物菌群的作用，从而提高机体免疫力。但目前市售产品其益生菌综合性能差，包括耐受性不高、产酸能力较低、产酶水平低等问题，导致产品效果收效甚微。

发明内容

为了解决上述现有技术中的不足，本发明通过分离、筛选、鉴定得到一株耐受性好、产酸能力强、产β-葡萄糖苷酶水平高、生长速度快的乳杆菌菌株HL-16并进行了保藏，将该菌应用于发酵中药中，具有明显的优势。

本发明采用的具体方案如下：

本发明的目的一是提供一株植物乳杆菌HL-16，所述植物乳杆菌HL-16为乳杆菌，分类命名为植物乳杆菌（ Lactiplantibacillus plantarum），已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国北京市，保藏编号为CGMCC NO.24035 ，保藏日期为2021年12月06日。

本发明的目的二是提供一种微生物菌剂，包含上述的植物乳杆菌HL-16。

本发明的目的三是提供一种利用所述的植物乳杆菌HL-16生产固态发酵中药的方法，包括以下步骤：

（1）、将大茎叶中药、麸皮、豆粕粉碎至40目，备用；

（2）、将步骤（1）按照含水量30%～60%混合，混匀备用；

（3）、向步骤（2）中接入固态发酵中药菌种，接种量为5%～10%；所述固态发酵中药菌种中，植物乳杆菌HL-16：酿酒酵母=4～1：1～4；再加入纤维素酶=0.1～0.3g/100g，混匀，于28℃～32℃，先有氧发酵2～3天，后无氧发酵4～5天即可。

上述生产固态发酵中药的方法，不限场地、操作简单、发酵时间短，利于养殖户或企业大批量生产。

其中，步骤（3）中，所述植物乳杆菌HL-16在接种前经活化和扩大培养，具体步骤如下：

步骤一、斜面固体培养：