[发明专利]一株植物乳杆菌HL-16及其应用有效
申请号: | 202210024620.3 | 申请日: | 2022-01-11 |
公开(公告)号: | CN114276967B | 公开(公告)日: | 2023-06-09 |
发明(设计)人: | 王大红;焦时阳;吴金鹏;侯玉新;王贺敏;陈明强;杨延辉;李文洁;王梦洋;王晓彤;孙建瑞;赵君峰;原江锋;古绍彬 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K35/747;A61K36/78;A61P31/04;C12R1/225 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 王艳艳 |
地址: | 471000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 杆菌 hl 16 及其 应用 | ||
1.一株植物乳杆菌HL-16,所述植物乳杆菌HL-16为乳杆菌属,分类命名为植物乳杆菌(
2.一种微生物菌剂,包含权利要求1所述的植物乳杆菌HL-16。
3.利用权利要求1所述的植物乳杆菌HL-16生产固态发酵中药的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)、将大茎叶中药、麸皮、豆粕粉碎至40目,备用;
(2)、将步骤(1)按照含水量30%~60%混合,混匀备用;
(3)、向步骤(2)中接入固态发酵中药菌种,接种量为5%~10%;所述固态发酵中药菌种中,植物乳杆菌HL-16:酿酒酵母=4~1:1~4;再加入纤维素酶=0.1~0.3g/100g,混匀,于28℃~32℃,先有氧发酵2~3天,后无氧发酵4~5天即可。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,按重量份数计,所述大茎叶中药包括:青蒿7~10份、黄芩9~12份、金银花1~3份、艾叶4~6份、鱼腥草1~2份、石韦0.5~2份、连翘叶5~8份和蒲公英2~4份;所述大茎叶中药与麸皮、豆粕的质量比为80~92:4~10:4~10。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述大茎叶中药与麸皮、豆粕的质量比为90:5:5。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,含水量40%。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,植物乳杆菌HL-16:酿酒酵母=3:2;所述固态发酵中药菌种的接种量为7%;纤维素酶 =0.2g/100g。
8.根据权利要求3或7所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述植物乳杆菌HL-16在接种前经活化和扩大培养,具体步骤如下:
步骤一、斜面固体培养:
将菌种接种在固体斜面培养基上,于30~37℃培养1~2天,得到斜面固体培养的活化菌种,备用;
所述的固体斜面培养基的配方为:每1000 mL培养基中包含8~15g蛋白胨、10~20g酵母粉、18~25g葡萄糖、1.8~3g脱脂奶粉、1.2~2.4g Vc、0.6~2.4g半胱氨酸、3~10g牛肉膏、3~10gCH3COONa、1~3g柠檬酸三铵、1~3gKH2PO4、0.1~1gMnSO4、0.1~1gMgSO4、0.5~2mL吐温80、1.5~2%琼脂粉、余量为水;
步骤二、摇瓶菌种扩大培养:
取步骤一得到的活化菌种,加入无菌水制成菌悬液,无菌水的加入量按照一只试管加入3~5mL;将菌悬液接种于液体种子扩大培养基中,接种量为液体种子扩大培养基体积的5~10%,培养温度30~37℃,静置培养即可,培养时间1~2天,得到种子液,作为发酵的种子;
所述的液体种子扩大培养基的配方为:每1000 mL培养基中包含8~15g蛋白胨、10~20g酵母粉、18~25g葡萄糖、1.8~3g脱脂奶粉、1.2~2.4g Vc、0.6~2.4g半胱氨酸、3~10g牛肉膏、3~10gCH3COONa、1~3g柠檬酸三铵、1~3gKH2PO4、0.1~1gMnSO4、0.1~1gMgSO4、0.5~2mL吐温80、余量为水。
9.权利要求1所述的植物乳杆菌HL-16或权利要求2所述的微生物菌剂在固态发酵中药中的应用。
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