[发明专利]一种罗布麻叶中三种黄酮类化学成分含量测定方法

说明书

本发明属于中药质量控制领域，尤其涉及一种采用超高液相‑串联质谱方法测定罗布麻叶中3种黄酮类化学成分含量的方法。本发明采用的超高液相‑串联质谱联技术是利用超高效液相先进行化学成分的分离，并由质谱完成待测物的定性和定量分析。本发明具有高选择性、线性范围大、高灵敏度、高准确度与精密度、分析时间短、样品处理步骤简单等优点，适用于异槲皮苷、紫云英苷、乙酰异槲皮苷含量差异较大的食品、药品质量分析，可为含异槲皮苷、紫云英苷、乙酰异槲皮苷的食品、药材质量评价研究及罗布麻叶的药典改进提供全新的检测方法，同时也可为异槲皮苷、紫云英苷、乙酰异槲皮苷三种化合物的体内分析研究提供技术参考。

技术领域

本发明属于中药质量控制领域，尤其涉及一种罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法。

背景技术

罗布麻叶（Apocynum venetum L.）是夹竹桃科植物罗布麻的叶，为我国传统中药，具有平肝安神、清热利水等功效，主要用于治疗肝阳眩晕、心悸失眠、浮肿尿少等症。研究表明，罗布麻叶主要活性成分为黄酮类化合物，具有降血压、抗氧化、抗抑郁、抗焦虑和降低胆固醇等多种药理活性。罗布麻叶在我国主要分布于新疆、青海、甘肃、陕西、山西、河南、河北、江苏、山东、辽宁及内蒙古等省区，主要野生在盐碱荒地和沙漠边缘及河流两岸、冲积平原、河泊周围及戈壁荒滩上。罗布麻叶含有多种化学成分，如黄酮类、氨基酸、脂肪酸醇酯及多种矿物质元素等。黄酮类化合物（flavonoids），原是指以2-苯基色原酮为骨架衍生的一类化合物的总称。现泛指两个苯环通过三个碳原子相互连接而成的一系列化合物的总称，即具有C6-C3-C6结构的一类化合物的总称，主要分为黄酮和黄酮醇、黄烷酮（又称二氢黄酮）和黄烷酮醇（又称二氢黄酮醇）、异黄酮、异黄烷酮（又称二氢异黄酮）、查耳酮、二氢查耳酮、橙酮（又称澳咔）、黄烷和黄烷醇等。其中乙酰异槲皮苷为黄酮醇类的代表化合物之一，研究表明以乙酰异槲皮苷为代表的黄酮醇类化合物为一类重要的生物活性成分，其在心血管系统疾病治疗，抗菌及抗病毒，抗肿瘤，抗氧化自由基，抗炎、镇痛，保肝等方面具有良好的药理活性。

心血管系统活性

不少治疗冠心病有效的中成药均含黄酮类化合物，研究发现芦丁、槲皮素、葛根素以及人工合成的立可定等均有明显的扩冠作用；槲皮素、芦丁、金丝桃苷、葛根素、灯盏花素、葛根总黄酮、银杏叶总黄酮对缺血性脑损伤有保护作用；金丝桃苷、水飞蓟素、木犀草素、沙棘总黄酮对心肌缺血性损伤有保护作用；银杏叶总黄酮、葛根素、大豆苷元等对心肌缺氧性损伤有明显保护作用。此外，沙棘总黄酮、苦参总黄酮、甘草黄酮（主要为甘草素和异甘草素）具有抗心律失常作用。

抗菌及抗病毒活性

木犀草素、黄岑苷、黄岑素等均有一定的抗菌作用；槲皮素、二氢槲皮素、桑色素、山柰酚等具有抗病毒作用；从菊花、獐牙菜中分离得到的黄酮单体对HIV病毒有较强抑制作用，大豆苷元、染料木素、鸡豆黄素A对HIV病毒也有一定抑制作用。

抗肿瘤活性

黄酮类化合物的抗肿瘤机制多种多样，如槲皮素的抗肿瘤活性与其抗氧化作用、抑制相关酶的活性、降低肿瘤细胞耐药性、诱导肿瘤细胞凋亡及雌激素样作用等有关；水飞蓟素的抗肿瘤活性与其抗氧化作用、抑制相关酶活性、诱导细胞周期阻滞等有关。

抗氧化自由基活性

大多数黄酮类化合物均有较强的抗氧化自由基作用，而黄酮类化合物的一些药理活性也往往与其抗氧化自由基相关。

抗炎、镇痛活性

芦丁、羟基芦丁、二氢槲皮素等对角叉菜胶、5-HT及PGE诱发的大鼠足爪水肿、甲醛引起的关节炎及棉球肉芽肿等均有明显抑制作用；金荞麦中的双聚原矢车菊苷元有抗炎、解热、祛痰等作用；金丝桃苷、芦丁、槲皮素及银杏叶总黄酮等有良好的镇痛作用。

保肝活性