[发明专利]一种罗布麻叶中三种黄酮类化学成分含量测定方法

权利要求书

1.一种罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法，其特征在于：所述含量测定方法为：

色谱条件：HSS C₁₈ SB色谱柱，2.1×100 mm, 1.8 μm；流动相B为乙腈，流动相D为0.2%甲酸水溶液，梯度洗脱；柱温：20～40°C；进样室温度10～30 ℃；流速：0.2～0.6 mL·min^-1；进样量：1～10 μL；梯度洗脱程序为：0～1 min，5%～9%B; 1～1.6 min，9%～10%B; 1.6～2.0min，10%～13%B；2～5 min，13%～14%B; 5～8 min，14%B; 8～10 min，14%～30%B; 10～11min，30%～45%A；11～11.5 min，45%～60%B；11.5～12 min，60%～90%B；12～12.5 min，90～5% B；

质谱条件：电喷雾离子源，以正、负离子模式同时扫描检测，扫描范围：100-1000，毛细管电压2.0～3.0 kV，离子源温度350～500 ℃，脱溶剂气N₂，气流900～1000 L·h^-1，碰撞气体氩气，碰撞气流0.05～0.3 mL·min^-1，多反应监测定量模式；

异槲皮苷对照品储备液的制备：取异槲皮苷对照品，加50%乙腈水溶液溶解并制成质量浓度为0.38 mg/mL的溶液；

紫云英苷对照品储备液的制备：取紫云英苷对照品，加50%乙腈水溶液溶解并制成质量浓度为0.33 mg/mL的溶液；

乙酰异槲皮苷对照品储备液的制备：取乙酰异槲皮苷对照品，加50%乙腈水溶液溶解并制成质量浓度为0.30 mg/mL的溶液；

混合对照品储备液的制备：分别精密吸取上述各对照品储备液1 mL置于同一个25 mL容量瓶中，50%乙腈水溶液稀释至刻度，得异槲皮苷、紫云英苷、乙酰异槲皮苷浓度分别为4.56、0.40、1.2 μg/mL的混合对照品溶液；

供试品溶液的制备：精密称取罗布麻叶0.1～3.0 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入40～100%甲醇30 mL，精密称定重量，采用超声-微波处理15～60 min，超声频率25～60KHz、超声功率100～1500 W、微波温度40～70 ℃，室温放冷，精密称定重量，无水甲醇补足减失重，摇匀，取上清液，0.22 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；

含量测定：精密吸取供试品溶液，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，测得峰面积值并计算含量，即可。

2.如权利要求1所述的罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法，其特征在于：所述的超声-微波处理是在超声功率1200 W，频率40 Hz，微波温度60 ℃下处理30 min。

3.如权利要求1所述的罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法，其特征在于：所述柱温：38°C；进样室温度：20 ℃；流速：0.3 mL·min^-1；进样量：1 μL。

4.如权利要求1所述的罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法，其特征在于：质谱条件：毛细管电压2.8 kV，离子源温度450 ℃，脱溶剂气N₂，气流1000 L·h^-1，碰撞气体氩气，碰撞气流0.10 mL·min^-1。

5.如权利要求1所述的罗布麻叶中三种黄酮类化学成分的含量测定方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：精密称取罗布麻叶0.5 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇20 mL，精密称定重量，采用超声-微波处理30 min，超声频率40 KHz、超声功率1200 W、微波温度60 ℃，室温放冷，精密称定重量，50%甲醇补足减失重，摇匀，取上清液，0.22 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。