[发明专利]一种诺如病毒检测探针及试剂盒、一种检测诺如病毒的方法

说明书

本发明提供了一种诺如病毒检测探针及试剂盒、一种检测诺如病毒的方法，属于电化学传感技术领域。在本发明中，少层Ti₃C₂T_x为二维纳米材料，具有良好的水溶解性和高比表面积，本发明利用Ag⁺对F‑Ti₃C₂T_x进行改性，Ag⁺可被Ti离子还原为Ag并原位在F‑Ti₃C₂T_x的表面和夹层上生长，形成F‑Ti₃C₂T_x@Ag复合材料。F‑Ti₃C₂T_x@Ag能够与修饰有巯基的诺如病毒适配体通过‑SH‑Ag化学结合，作为特异性识别诺如病毒的检测探针。同时，Ag在磷酸盐缓冲液中具有电信号响应，作为电化学传感器的探针时不需要另外选择孵育电信号物质，可简化检测程序，实现诺如病毒的简单快速、低成本检测。

技术领域

本发明涉及电化学传感技术领域，特别涉及一种诺如病毒检测探针、一种检测诺如病毒的方法。

背景技术

诺如病毒(noroviruses,NoVs)是引起儿童病毒性腹泻的主要病原体之一，也是导致全球所有年龄段人群食源性疾病和胃肠炎暴发的主要原因。诺如病毒相关性胃肠炎临床上以呕吐、腹泻为主要表现，可伴有发热、恶心、腹痛、厌食等。最初，由于患者在感染后以呕吐为常见症状，且秋冬季节是频发季节，所以也被称为“冬季呕吐病”。虽然大多数患者感染程度较轻，但也有出现住院、死亡等重症病例，特别是在5岁以下儿童、65岁以上老年人和免疫力低下者。

人类诺如病毒属于杯状病毒科诺如病毒属。病毒颗粒呈圆形，结构简单，无包膜，表面光滑，只有一层衣壳蛋白。它体积较小，直径约27～40nm，包含从衣壳中延伸出来的长约4.5nm放射性突起，在电子显微镜下显示出杯状结构。基因组由约为7.5～7.7kb的线性正义RNA组成。NoVs根据其VP1氨基酸序列的不同，可分为7个基因组(GI～GVII)。人类诺如病毒感染往往是由GII(主要是GII.4)、GI和GIV引起，感染频率为GIIGIGIV。研究发现，每一次诺如病毒的大流行都与GII.4新变种的出现有关，表现出一定的周期性突变替换模式。因此，由GII.4分离株引起的疾病也被认为是临床胃肠炎病例的最常见原因。

实时荧光RT-PCR技术(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)是在普通RT-PCR基础上利用染色或探针监测PCR反应管中的荧光信号从而达到定量的目的，是目前国内外检测果蔬中NoVs的标准，但是检测成本高、需要高昂的仪器设备，并且需要专业的人员操作。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种诺如病毒检测探针、一种检测诺如病毒的方法。本发明提供的诺如病毒检测探针能够作为电化学传感器的探针实现诺如病毒的简单快速、低成本检测。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种诺如病毒检测探针，包括修饰有巯基的诺如病毒适配体和与所述修饰有巯基的诺如病毒适配体化学结合的少层Ti₃C₂T_x@Ag纳米颗粒复合材料；

所述少层Ti₃C₂T_x@Ag纳米颗粒为少层Ti₃C₂T_x和负载于所述少层Ti₃C₂T_x表面和夹层间隙的Ag纳米颗粒。

优选的，所述诺如病毒为GⅡ.4亚型诺如病毒。