[发明专利]一种在大鼠离乳期给与3-MA处理制备神经发育缺陷大鼠模型的方法

说明书

本发明提供一种在大鼠离乳期给与3‑MA处理制备神经发育缺陷大鼠模型的方法，包括给予正常离乳期大鼠连续7天腹腔注射自噬抑制剂3‑MA制备抑制自噬发生的大鼠模型，并通过免疫印迹检测自噬发生，而后通过三箱社交实验验证社交障碍、开放旷场实验、高架十字迷宫实验以及黑白箱实验验证大鼠模型焦虑水平是否增加，通过Y迷宫实验和被动规避实验验证大鼠模型是否出现记忆损伤，大鼠模型与对照组进行高尔基体染色，观察海马和额叶神经元及突触形态。通过多次实验发现，离乳期3‑MA处理制备神经发育缺陷的大鼠模型，具有成本低廉，造模周期短，模型行为异常更明显，稳定性更好的优势，可用于精神分裂症、孤独症等疾病研究及新药研发。

技术领域

本发明属于精神病研究技术领域，具体涉及一种在大鼠离乳期给与3-MA处理制备神经发育缺陷大鼠模型的方法。

背景技术

大量研究显示母孕期感染是精神障碍以及神经系统疾病的高风险因素，其子代罹患精神分裂症、自闭症、双相情感障碍、重度抑郁等精神疾病的风险显著增加。基于流行病学发现，目前精神疾病基础研究最常用的神经发育障碍模型是母孕期感染子代大鼠模型。但该模型造模周期长，子代模型成功率较低，模型不稳定。针对该模型效果不佳的特点，国内外研究者在此模型基础上进行改进，提出“二次打击模型”，即在孕期感染子代基础上，在子代出生后给予各种不良环境刺激，试图制备效果优越的发育缺陷模型。本课题组也多次尝试“二次打击模型”模型，效果不佳，且程序繁琐，影响因素较多，实验重复性不好。

因此，急需一种能够稳定、快速制备神经发育缺陷大鼠模型的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种在大鼠离乳期给与3-MA处理制备神经发育缺陷大鼠模型的方法，具体方案如下：

一种在大鼠离乳期给与3-MA处理制备神经发育缺陷大鼠模型的方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤一：给予正常离乳期大鼠连续7天腹腔注射自噬抑制剂3-MA制备抑制自噬发生的大鼠模型，并通过免疫印迹检测对照组与大鼠模型的Becelin、P62以及LC3Ⅱ的表达来检验自噬的发生；

步骤二：对步骤一中的大鼠模型在成年期与对照组进行三箱社交实验检验大鼠模型是否有社交障碍；

步骤三：对步骤一中的大鼠模型在成年期与对照组进行开放旷场实验、高架十字迷宫实验以及黑白箱实验验证大鼠模型焦虑水平是否增加；

步骤四：对步骤一中的大鼠模型在成年期与对照组进行Y迷宫实验和被动规避实验验证大鼠模型是否出现记忆损伤；

步骤五：对步骤一中的大鼠模型与对照组按照高尔基体染色试剂盒的步骤（FDRapid GolgiStain^TM Kit，PK401A），进行高尔基体染色，观察海马和额叶神经元及突触形态。

基于上述，所述步骤一中自噬抑制剂中3-MA的含量为3 mg/kg。

基于上述，所述大鼠为SD大鼠。

本发明相对现有技术具有突出的实质性特点和显著的进步，具体地说，本发明具有以下优点：

本发明中，根据多次实验发现，与孕期感染子代大鼠模型以及“二次打击模型”相比，离乳期3-MA处理制备神经发育缺陷的大鼠模型，具有成本低廉，操作简单，造模周期短，行为异常更明显，模型稳定性更好，科研工作可重复性强等特点，可用于精神分裂症、孤独症等疾病致病机制的研究以及新药研发。

附图说明

图1是本发明中大鼠模型在成年期与对照组进行免疫印迹检测Becelin、P62以及LC3Ⅱ的表达的图谱。

图2是本发明中大鼠模型在成年期与对照组进行三箱社交实验数据分析图。

图3是本发明中大鼠模型在成年期与对照组进行开放旷场实验、高架十字迷宫实验以及黑白箱实验数据分析图。