[发明专利]用于产生病毒样颗粒的载体及其用途

权利要求书

1.表达载体，其包含

表达盒，所述表达盒包含编码重组蛋白的核酸序列，所述重组蛋白包含与免疫原性氨基酸序列融合的来自病毒的保守氨基酸序列；

位于所述表达盒每一侧翼的用于第一重组酶的靶序列；和

整合在用于所述第一重组酶的靶序列的非结合区内的用于一个或多个额外重组酶的一个或多个额外靶序列，

其中从所述表达盒细胞内表达的蛋白质能够形成病毒样颗粒(VLP)。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其中所述免疫原性氨基酸序列与所述保守氨基酸序列来自同一病毒。

3.根据权利要求1或2所述的表达载体，其中所述保守氨基酸序列来自病毒糖蛋白。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其中所述免疫原性氨基酸序列来自相同的病毒糖蛋白。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的表达载体，其中所述表达盒还包含编码病毒包膜蛋白的核酸序列和/或编码病毒基质蛋白的核酸序列。

6.根据权利要求5所述的表达载体，其中所述病毒包膜蛋白和/或病毒基质蛋白来自与保守氨基酸序列相同的病毒。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的表达载体，其中所述保守氨基酸序列、免疫原性氨基酸序列、病毒包膜蛋白和/或病毒基质蛋白是共有序列。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的表达载体，其中所述重组蛋白能够刺激针对病毒的免疫应答，包括产生中和抗体。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的表达载体，其中所述重组蛋白能够刺激Th1细胞介导的针对病毒的免疫应答。

10.根据权利要求8或9所述的表达载体，其中所述免疫应答对相关病毒或毒株是交叉反应的。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的表达载体，其中所述重组蛋白排除了病毒中刺激包括产生非中和抗体的免疫应答和/或刺激Th2细胞介导的免疫应答的氨基酸序列。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的表达载体，其中所述表达盒包含单个可读框，所述单个可读框包含每个编码蛋白质的核酸序列之间的编码自切割肽的核酸序列。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的表达载体，其中所述病毒是冠状病毒、流感病毒、人类免疫缺陷病毒、人类乳头瘤病毒、肝炎病毒或溶瘤病毒。

14.根据权利要求13所述的表达载体，其中所述病毒是冠状病毒。

15.根据权利要求14所述的表达载体，其中所述冠状病毒是COVID-19。

16.根据权利要求14或15所述的表达载体，其中所述表达盒包含编码冠状病毒膜(M)蛋白、冠状病毒包膜(E)蛋白和重组蛋白的核酸序列，所述重组蛋白包含来自冠状病毒刺突(S)蛋白的保守氨基酸序列和免疫原性氨基酸序列。

17.根据权利要求16所述的表达载体，其中所述保守氨基酸序列来自S蛋白S2'切割位点和内部融合肽(IFP)。

18.根据权利要求16或17所述的表达载体，其中所述保守氨基酸序列包含SEQ IDNO:12。

19.根据权利要求16-18中任一项所述的表达载体，其中所述免疫原性氨基酸序列来自S蛋白受体结合结构域(RBD)。