[发明专利]结合CD20的二聚体抗原受体（DAR）

说明书

本公开提供了结合CD20靶抗原的二聚体抗原受体(DAR)构建体，其中所述DAR构建体包含一条多肽链上的重链结合区以及单独的另一多肽链上的轻链结合区。构成所述二聚体抗原受体的两条多肽链可以二聚化以形成抗原结合结构域。所述二聚体抗原受体具有抗体样特性，因为所述二聚体抗原受体与靶抗原特异性结合。所述二聚体抗原受体可以用于定向细胞疗法。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2020年2月27日提交的美国临时申请第62/982,348号和于2020年10月9日提交的美国临时申请第63/089,869号的优先权的权益，所述美国临时申请中的每个申请的内容通过引用以其整体并入本文。

发明领域

本公开提供了表达特异性结合CD20的二聚体抗原受体(DAR)的转基因细胞、编码二聚体抗原受体的核酸、包含核酸的载体以及使用转基因细胞治疗疾病的方法。

背景技术

嵌合抗原受体(CAR)已经被开发到靶向特别是与癌症相关的抗原。第一代CAR被工程化为含有仅递送活化刺激(信号1)的信号传导结构域(TCRζ)(Geiger等人,《免疫学杂志(J.Immunol.)》162(10):5931-5939,1999；Haynes等人,《免疫学杂志》166(1):182-187,2001)(Hombach等人《癌症研究(Cancer Res.)》61(5):1976-1982,2001；Hombach等人,《免疫学杂志》167(11):6123-6131,2001；Maher等人,《自然生物技术(Nat.Biotechnol.)》20(1):70-75,2002)。仅用第一代CAR移植的T细胞由于不理想的活化作用而展现出有限的抗肿瘤功效(Beecham等人,《免疫疗法杂志(J.Immunother.)》23(6):631-642,2000)。第二代CAR，即免疫球蛋白-CD28-T细胞受体(IgCD28TCR)，将CD28共刺激结构域(信号2)并入到第一代受体中(Gerstmayer等人,《免疫学杂志》158(10)4584-4590,1997；Emtage等人,《临床癌症研究(Clin.Cancer Res.)》14(24):8112-8122,2008；Lo,Ma等人,《临床癌症研究》16(10):2769-2780,2010)，这导致CAR-T细胞具有更强的抗肿瘤能力(Finney等人,《免疫学杂志》161(6):2791-2797,1998；Hombach等人,《癌症研究》61(5):1976-1982,2001,Maher等人,《自然生物技术》20(1):70-75,2002)。通过用具有类似功能的分子(如FcRγ、4-1BB和OX40)替代TCRζ或CD28的信号结构域，已经开发了各种CAR变体(Eshhar等人,《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.U S A)》90(2):720-724,1993)。已经开发了针对各种肿瘤抗原的TCR CAR-T细胞(Ma等人,《癌症基因疗法(Cancer Gene Ther.)》11(4):297-306,2004；Ma等人,《前列腺(Prostate)》61(1):12-25,2004；Lo等人,《临床癌症研究》16(10):2769-2780,2010；Kong等人,《临床癌症研究》18(21):5949-5960,2012；Ma等人,《前列腺》74(3):286-296,2014；Katz等人,《临床癌症研究》21(14):3149-3159,2015；Junghans等人,2016《前列腺》,76(14):1257-1270)。

通过输注用嵌合抗原受体(CAR)工程化的T细胞用于重定向杀瘤活性的过继免疫疗法代表了用于治疗转移癌的潜在高特异性形式。靶向CD19(即在B细胞上表达的分子)的CAR-T细胞在治疗B细胞恶性肿瘤上已经获得成功并且已经获得FDA批准，其中一些试验示出高达70％的应答率，包括持续的完全应答。(替沙仑赛)CD19 CAR-T细胞被批准用于B细胞ALL；(阿基仑赛)CD19 CAR-T细胞被批准用于大B细胞淋巴瘤；并且(布瑞基奥仑赛)CD19 CAR-T细胞被批准用于大B细胞淋巴瘤。

发明内容