[发明专利]一种水杨酸糖基转移酶活性的检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种水杨酸糖基转移酶活性的检测试剂盒，其特征在于：包括以下试剂：

试剂1：1.211g Tris+100mL水+0.05mL盐酸+30.8mg DTT+5.23mg苯甲基磺酰氯+0.4gBSA+0.1％吐温-100；

试剂2：1.211g Tris+100mL水+0.5g PEG4000+5μL巯基乙醇；

试剂3：27mg UDP-Gal；

试剂4：23mg SA。

2.一种水杨酸糖基转移酶活性的检测方法，使用了如权利要求1所述的水杨酸糖基转移酶活性的检测试剂盒，其特征在于：包括如下步骤：(1)绘制水杨酸-D-葡萄糖的标准曲线；(2)从植物样本中提取水杨酸糖基转移酶；(3)采用提取的水杨酸糖基转移酶与SA进行反应；(4)仪器检测；(5)计算。

3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，配制多组浓度不同的水杨酸-D-葡萄糖标准溶液，采用高效液相色谱仪进行测试，得到一系列谱图，拟合得到谱图的峰面积与水杨酸-D-葡萄糖标准溶液浓度之间的标准曲线。

4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，采用试剂1提取植物样本中的水杨酸糖基转移酶。

5.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：检测之前，将一定量的试剂2加入试剂3中混匀后，得到试剂5；将一定量的试剂2加入试剂4中，得到试剂6；步骤(3)中，在步骤(2)提取得到的水杨酸糖基转移酶中依次加入试剂5和试剂6，进行反应。

6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，将步骤(2)提取得到的水杨酸糖基转移酶在沸水浴中加热，然后冷却至室温后，再依次加入试剂5和试剂6进行反应，作为对照组；步骤(3)中，将步骤(2)提取得到的水杨酸糖基转移酶，未经沸水浴加热直接依次加入试剂5和试剂6进行反应，作为检测组。

7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于：步骤(4)中，将对照组和检测组的产物采用高效液相色谱仪进行测试。

8.如权利要求3或7所述的检测方法，其特征在于：采用高效液相色谱仪进行测试时，流动相中，甲醇与水的体积比为50:50，且流动相中含有乙酸。

9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于：所述乙酸与水的体积比为1:1000。

10.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于：步骤(5)中，根据对照组和检测组的色谱图中的峰面积，以及水杨酸-D-葡萄糖的标准曲线，计算检测组中水杨酸-D-葡萄糖的浓度，以此计算得到植物样本中水杨酸糖基转移酶的活性。