[发明专利]一种Pickering乳液及基于该乳液酶催化制备手性醇类化合物的方法

权利要求书

1.一种Pickering乳液，其特征在于，所述乳液采用如下方法制备而成：

步骤a，将SiO₂纳米颗粒超声分散于有机溶剂中，然后加入疏水硅烷和三乙胺或正己胺，在温度为100-120 ℃、氮气保护条件下搅拌回流3~6 h；冷却后离心分离，采用甲苯洗涤3-5次，在50-100℃真空干燥箱中烘干，得到具有界面活性的疏水性SiO₂纳米颗粒；

步骤b，将步骤a中得到的疏水性SiO₂纳米颗粒加入到有机溶剂中，超声分散均匀后获得油相体系；将酮还原酶和辅因子以及“连接剂”加入到PBS缓冲溶液中，混合均匀后得到水相体系；采用倾倒法将油水两相混合，然后迅速高速搅拌，形成包封酮还原酶和辅因子的粒径均一的油包水型Pickering乳液，而后吸出多余油相；

所述“连接剂”选自聚丙烯酸、聚乙烯亚胺、四乙烯五胺、五乙烯六胺中的一种。

2.如权利要求1所述的一种Pickering乳液，其特征在于，所述步骤a中疏水硅烷选自甲基三甲氧基硅烷、二氯二甲基硅烷、辛基三甲氧基硅烷中的一种。

3.如权利要求1所述的一种Pickering乳液，其特征在于，所述酮还原酶选自ES-KRED-101~ ES-KRED-287及其突变体中的一种或多种，所述辅因子选自烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸中的一种。

4.如权利要求1所述的一种Pickering乳液，其特征在于，所述PBS缓冲液与界面活性SiO₂质量比为1:0.02~1:0.10；所述PBS缓冲液与有机溶剂的体积比为1:0.5~1:10；所述高速搅拌转数为5000~10000 rpm。

5.如权利要求1所述的一种Pickering乳液，其特征在于，所述有机溶剂为甲苯、庚烷、己烷、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚或辛烷中的一种。

6.如权利要求1所述的一种Pickering乳液，其特征在于，步骤a中的SiO₂纳米颗粒是采用stöber合成法制备，尺寸为60-80 nm；步骤b中Pickering乳液微滴的直径为5-300 μm，酮还原酶含量为1-500 μL/mL PBS缓冲液。

7.一种基于Pickering乳液酶催化高效制备手性醇类化合物的方法，其特征在于，将辅因子再生所需的辅因子再生物与底物加入至权利要求1-6任意一项所述的Pickering乳液体系中，在静置条件下进行反应，反应结束后加入油相萃取出产物，而后再次加入底物继续反应。

8.如权利要求7所述的一种基于Pickering乳液酶催化高效制备手性醇类化合物的方法，其特征在于，所述辅因子再生物选自以下几种辅因子再生物中的一种：葡萄糖和葡萄糖脱氢酶、异丙醇、甲酸铵和甲酸铵脱氢酶、2-辛醇、2-庚醇。

9.如权利要求7所述的一种基于Pickering乳液酶催化高效制备手性醇类化合物的方法，其特征在于，所述底物选自以下几种底物中的一种：含有复杂取代基的芳香酮类化合物、双酮类化合物和脂肪酮类化合物。

10.如权利要求7所述的一种基于Pickering乳液酶催化高效制备手性醇类化合物的方法，其特征在于，所述反应的温度为25~50℃。