[发明专利]量子点胶束球形核酸传感器及其制备方法和在Pb2+

权利要求书

1.一种量子点胶束球形核酸传感器，其特征在于，所述传感器通过在量子点胶束表面偶联适体酶和猝灭剂修饰的酶底物得到，所述适体酶由5’-氨基修饰的铅离子适配体与DNA酶序列杂交形成；所述酶底物为包含rA位点的发夹结构DNA，其5’端修饰氨基，3’端修饰猝灭剂。

2.根据权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器，其特征在于，所述DNA酶优选为镁离子或锌离子特异性核酸酶序列。

3.根据权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器，其特征在于，所述猝灭剂为BHQ2。

4.根据权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器，其特征在于，所述5’-氨基修饰的铅离子适配体、DNA酶序列、酶底物分别为：

NH₂-(CH₂)₆-TTTTTTACACAGTACACCGCCTTGTCGCAGTCATACGAATCCACATGGGTGGGTGGGTGGGT；

CATGTTCAGCGATCCGGAACGGCACCCATGTGGATT；

NH₂-(CH₂)₆-TTTTTTACACAGTACAAATCCrAGGAACATGAGCGATCCGGAACGGCACCCATGTACTGTGTTTTTTT-BHQ2。

5.根据权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器，其特征在于，所述量子点胶束通过量子点与二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基(DSPE-PEG-COOH)通过薄膜水化超声的方法制备得到。

6.一种权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

向含QM缓冲液中加入EDC溶液，Sulfo-NHS溶液活化；向该缓冲液中加入适体酶溶液、猝灭剂修饰的酶底物，搅拌反应后，超滤提纯得到量子点胶束球形核酸传感器。

7.一种权利要求1所述的量子点胶束球形核酸传感器在Pb²⁺检测中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述量子点胶束球形核酸传感器在Pb²⁺定量检测中的应用。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述量子点胶束球形核酸传感器中的适体酶特异性结合Pb²⁺形成G-四链体，释放DNA酶，DNA酶在镁离子的辅助下以酶底物为轨道自动行走；采用荧光分光光度计测量行走结束后量子点胶束的荧光信号，实现对Pb²⁺的检测分析。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，加入的靶标Pb²⁺与适体酶中的适配体单元特异性结合形成G-四链体，同时释放DNA酶单元，释放的DNA酶自动识别酶底物，结合金属离子后酶活性激活，特异性剪切底物上的rA位点，释放带有猝灭剂的片段，DNA酶行走导致大量猝灭剂远离量子点胶束表面，荧光共振能量转移效应消失，量子点胶束荧光恢复。