[发明专利]一种用于肝微核试验的福尔马林固定法在审
申请号: | 202111641208.8 | 申请日: | 2021-12-29 |
公开(公告)号: | CN114323878A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 周长慧;常艳;赵田田;赵泽浩;杨紫轩;李嫚琪;许瀚林;何伟伟 | 申请(专利权)人: | 上海益诺思生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 吕学辰;黄益澍 |
地址: | 201203 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 核试验 福尔马林 固定 | ||
1.一种福尔马林固定法,其特征在于,其包含碱处理后研磨组织块获得分散的细胞、使用孔径为30-50μm的细胞滤网过滤、经离心后用中性福尔马林溶液重悬细胞获得细胞悬液,使用去离子水稀释4000~6000倍后的SYBR GOLD染液对细胞悬液染色。
2.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述离心的速度为45-66g,优选50g;所述离心的时间为1-5min,优选2min。
3.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述细胞滤网的孔径为40μm。
4.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述染色为将稀释的SYBR GOLD染液与所述细胞悬液以体积比0.5~1.5:1混合;
所述SYBR GOLD染液的稀释倍数优选5000倍;
所述体积比优选1:1。
5.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述中性福尔马林溶液为体积百分比为4%-10%的福尔马林缓冲液;
优选地,所述福尔马林缓冲液的体积百分比为10%。
6.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述中性福尔马林溶液为中性福尔马林磷酸盐缓冲液。
7.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述组织为保存于体积百分比为4%-10%的中性福尔马林磷酸盐缓冲液溶液中的组织;优选保存于体积百分比为10%的中性福尔马林磷酸盐缓冲液溶液中的组织。
8.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述组织为肝组织,优选肝左外叶组织。
9.如权利要求1所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述碱处理包含将组织块置于10-13M KOH溶液中,室温处理15-20h,用水冲去残留KOH。
10.如权利要求9所述的福尔马林固定法,其特征在于,所述KOH溶液的浓度为12M;和/或,所述室温处理的时间为16h。
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