[发明专利]一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用，具有核‑壳双层结构，以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽‑PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳;以胎盘巨噬细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体作为内核，所述药物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、调控胎盘巨噬细胞功能的小分子药物、治疗基因或其组合。本发明的微环境巨噬细胞调控递送系统可有效避免母体和胎儿非特异性药物吸收，进而实现对胎盘内巨噬细胞特异性药物的递送和功能调控。

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用。

背景技术

既往妊娠期间发生的恶性肿瘤并不常见，但随着近年来平均妊娠年龄的推迟，以及辅助生殖技术的发展，妊娠合并恶性肿瘤的发病率逐渐升高％。妊娠合并恶性肿瘤进入孕产妇死亡原因前五位，给母儿安全带来巨大影响【冯玲,何梦舟,王少帅.妊娠合并恶性肿瘤对孕产妇死亡的影响[J].实用妇产科杂志,2021,37(03):178-180.】。在妊娠合并恶性肿瘤中，处理最为棘手的是发病于孕妇胎盘部位的妊娠合并滋养细胞肿瘤。此类肿瘤的病理学特点为，肿瘤发生于胎盘种植部位，为体积大小不一的实体肿瘤，瘤体可局限于子宫，也可突向宫腔呈息肉状，或侵入肌层甚至穿破浆膜，形成转移【虞海燕.足月妊娠合并胎盘部位滋养细胞肿瘤3例误诊分析[J].实用妇产科杂志,2006(09):548-549.】。该类肿瘤存在于胎盘中，与胎盘组织密不可分，无法采用手术手段进行处理，如果采用药物治疗，往往伤及胎儿导致流产。但是，目前缺乏能够直接杀伤胎盘中滋养细胞来源肿瘤细胞的药物，需要寻找包括免疫治疗在内的其他疗法，实现对此类肿瘤的杀伤。

巨噬细胞(macrophage)是恶性实体肿瘤组织中最多的免疫细胞，在肿瘤微环境中多为接近M2表型的促肿瘤的表型，此类巨噬细胞在肿瘤发生发展中起到重要作用【BioactMater. 2020 Dec 26；6(7):1973-1987.】。包括滋养细胞肿瘤等生殖系统肿瘤的发生发展中，巨噬细胞同样起到重要的免疫调节作用【Evol Med Public Health.2018 Apr 14；2018(1):106-115.】在胎盘相关肿瘤中，这一作用尤其显著。这是因为，胎盘巨噬细胞是胎盘内最先出现和含量最高的免疫细胞【Annu Rev Immunol.2013；31:387-411.】。巨噬细胞在肿瘤微环境中和胎盘中，均可能出现M1型和M2型等表型，一般在胎盘微环境中，多为可以促进肿瘤、抑制免疫杀伤的M2 表型【Arch Immunol Ther Exp(Warsz).2019 Oct；67(5):295-309.】。所以，如果能够对胎盘中肿瘤组织里的M2型巨噬细胞表型进行调控，使其转换为具有抗肿瘤作用的M1表型，将可以有效地抑制肿瘤的生长，使患者获得较好的预后【FrontBiosci.2008 Jan 1；13:453-61.】。

如何实现胎盘内肿瘤中巨噬细胞M2表型向M1表型的转变？我们在前期研究中发现，如果能够促进M2型巨噬细胞NF-κB通路活性，可以起到向M1表型转化的作用。同时，如果能抑制巨噬细胞PPARγ(Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma)活性，也可以促进向M1表型转化【Eur J Pharmacol.2020 Jun 15；877:173090.】。联合应用NF-κB/PPARγ两种调控手段，将会起到协同促进M2型巨噬细胞向抗肿瘤的M1表型转化的效果【IntJ Mol Sci.2020 Dec 16；21(24):9605；Annu Rev Physiol.2010；72:219-46.】。我们在前期已经证实单独或联合应用NF-κB激活剂(如Betulinic acid)和PPARγ抑制剂(如siRNA)，可以实现有效的M2巨噬细胞再极化为M1细胞的效果，并且证明这种转化可以产生肿瘤杀伤效果。所以，如果能够实现体内联合应用Betulinic acid和PPARγ-siRNA，促进胎盘内确切的M1巨噬细胞增加，进而产生抗肿瘤效果，就有望有效改善妊娠合并滋养细胞肿瘤的治疗困境。