[发明专利]鸡内金和/或醋鸡内金及制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法

说明书

本发明属于中药检测技术领域，具体提供了鸡内金和/或醋鸡内金及制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法，所述构建方法构建得到的特征图谱中含有11个共有特征峰，显著提升了特征峰的数量，而且准确指认了其中的尿苷峰、鸟苷峰、尿嘧啶峰和腺苷峰，因此构建方法能够有效提升鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂特征图谱的精确度，能够充分反应鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂的整体性和特征性，这有利于更加全面地监控鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂的质量。

技术领域

本发明涉及中药检测技术领域，具体涉及一种鸡内金和/或醋鸡内金及制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法。

背景技术

鸡内金，是鸡胃内的角质层，为常用中药，始载于《神农本草经》(禽)上品丹雄鸡项下，2020年版《中华人民共和国药典》将其收载为雉科动物家鸡Gallus gallus domesticusBrisson的干燥沙囊内壁。其味甘，性平，归属脾、胃、小肠、膀胱经，具有健胃消食、涩精止遗、通淋化石的功效，常用于治疗呕吐、腹泻、小儿囤积、遗尿、遗精、石滴痛、胆道忧郁症等疾病。

2020年版《中华人民共和国药典》中，鸡内金药材质量标准仅包括性状、检查(水分、总灰分)和浸出物等检查项，但是并无关于其鉴别、含量测定的检查项，不能实现对鸡内金产品整体质量进行准确描述和评价。作为一味应用历史悠久的药食两用中药，前人对鸡内金的化学组成、药理作用和临床应用开展了许多研究。但是鉴于其化学成分复杂，目前还未见到详细的文献报道揭示其具体有效成分。

现有针对鸡内金的质量研究主要集中在蛋白质、多糖、酶、氨基酸等成分，例如：刘其凤等对鸡内金进行了提取与简单的分析，发现其碱提取物中蛋白质含量约占60％，而其中呈现氨基糖阳性反应的占10％左右，因此初步认为鸡内金中有效成分可能主要是糖蛋白类物质(参见刘其凤等，《鸡内金蛋白类成分的提取与测定》，华西药学杂志，2004，19(4)：281-282)；孙颖等对鸡内金的淀粉酶进行了理化性质研究(参见孙颖等，《鸡内金淀粉酶理化特征研究》，中国中医药信息杂志，2007，14(4)：46-48)；陆维承、李传俊、吕武清等人对不同鸡内金炮制品的酶活力进行测定比较，用来确定鸡内金的最佳炮制辅料及炮制方法(参见陆维承等，《不同炮制工艺对鸡内金中淀粉酶活力的影响》，海峡药学，2010，22(4)：35-36；李传俊等，《鸡内金不同辅料炮制品的酶活性和氨基酸的含量测定》，中国现代医生，2009，47(15)：74-75；吕武清等，《炮制对鸡内金中酶和氨基酸的影响》，中国中药杂志，1994，19(4)：222-223)；梁琨等通过柱前衍生化RP-HPLC测定鸡内金中16种氨基酸的含量(参见梁琨等，《柱前衍生化RP-HPLC测定鸡内金中16种氨基酸的含量》，中国中药杂志，2014，39(8)：1463-1467)。

《上海市中药配方颗粒质量标准-鸡内金配方颗粒》建立了鸡内金配方颗粒特征图谱及含量测定的相关标准，该标准中的方法有效分离的成分较少，分离效果较差，构建的特征图谱的特征峰数量较少，不能全面监控鸡内金产品的质量。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中鸡内金产品质量标准中相关特征图谱因分离度较低而不能全面监控鸡内金产品的质量的缺陷，从而提供一种鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂的特征图谱及其构建方法和鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂的含量测定方法。

为此，本发明提供了一种鸡内金及其制剂和/或醋鸡内金及其制剂的特征图谱的构建方法，包括如下步骤：(1)制备供试品溶液，供试品选自鸡内金、鸡内金制剂、醋鸡内金或醋鸡内金制剂中的任意一种；(2)取供试品溶液采用高效液相色谱法检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序包括：0min→13min→15min→55min→60min，流动相中甲醇的体积百分比为0％→5％→10％→60％→60％，流动相流速为1.0ml/min→0.5ml/min→0.8ml/min→1.0ml/min→1.0ml/min。