[发明专利]一种间充质干细胞培养基和基于DOE实验设计的培养基优化方法

说明书

本申请涉及干细胞培养的技术领域，具体公开了一种间充质干细胞培养基和基于DOE实验设计的培养基优化方法。间充质干细胞培养基包括以下组分：基础培养基，所述基础培养基中至少添加启动水QDS和启动水QDY中的一种，所述启动水QDS在所述基础培养基中的体积百分含量为3%~12%，所述启动水QDY在所述基础培养基中的体积百分含量为3%~12%。本申请的间充质干细胞培养基可用于间充质干细胞培养，其具有获得的活细胞数量更多的优点。

技术领域

本申请涉及干细胞培养的技术领域，更具体地说，它涉及一种间充质干细胞培养基和基于DOE实验设计的培养基优化方法。

背景技术

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)具有自我更新能力，且可在特定的培养条件下分化为造血细胞、骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肌肉细胞等，也可跨越胚层界限分化为神经细胞、肝细胞、胰岛细胞等。间充质干细胞最初主要在骨髓中分离得到，而后从骨、脂肪、羊膜、胎盘、脐带、脐血、牙髓、肌腱和骨骼肌等组织中也可获得。间充质干细胞具有来源广泛、容易分离、能快速扩增等优点，以及具有较低免疫原性和免疫调节能力，因此成为组织工程、再生医学和免疫抑制治疗领域重要的种子细胞来源。由于间充质干细胞是成体干细胞，在体内原始含量很少，为满足临床治疗的应用，需要在体外进行快速有效地扩增培养，同时还需保持其多向分化潜能和未分化状态。

目前，体外扩增间充质干细胞最常使用添加胎牛血清的基础培养基；还有部分是不添加胎牛血清的人脐带间充质干细胞无血清培养；采用该类培养基进行间充质干细胞时，还存在间充质干细胞扩增效果差，例如活细胞数量低的问题。

发明内容

为了提高相关间充质干细胞培养基培养得到的间充质干细胞的活细胞数量，本申请提供一种间充质干细胞培养基和基于DOE实验设计的培养基优化方法。

第一方面，本申请提供一种间充质干细胞培养基，采用如下的技术方案：

一种间充质干细胞培养基，包括以下组分，基础培养基，所述基础培养基中至少添加启动水QDS和启动水QDY中的一种，所述启动水QDS的添加量为所述基础培养基体积百分含量的3%~12%，所述启动水QDY的添加量为所述基础培养基体积百分含量的3%~12%。

通过采用上述技术方案，本申请在配置间充质干细胞培养基时，通过在其基础培养基中添加有一定含量的启动水QDS和启动水QDY中的至少一种，能够提高培养得到的间充质干细胞的活细胞数。在该方案中，当基础培养基是无血清培养基时，其中，当启动水QDS和启动水QDY共同添加，且添加量均为10%时，启动水QDS和启动水QDY的共同添加将会对间充质干细胞的活细胞数量有负面影响。因此“基础培养基是无血清培养基且于基础培养基中同时添加10%启动水QDS和10%启动水QDY”的方案是不包含在本申请中的；进一步的，“基础培养基是无血清培养基且于基础培养基中同时添加7%~12%启动水QDS和7%~12%启动水QDY”的方案也是不包含在本申请中的。此外，当基础培养基是无血清培养基时，仅仅添加5%的启动水QDY，也将会对间充质干细胞的活细胞数量有负面影响。因此“基础培养基是无血清培养基且仅添加5%的启动水QDY”的方案是不包含在本申请中的；进一步的，“基础培养基是无血清培养基且仅添加3%~7%的启动水QDY”的方案也是不包含在本申请中的。