[发明专利]一种用于电泳分离物回收的用具及其使用方法在审

专利信息
申请号: 202111592020.9 申请日: 2021-12-23
公开(公告)号: CN114277027A 公开(公告)日: 2022-04-05
发明(设计)人: 邢少军;吴赟辰;刘晨 申请(专利权)人: 深圳大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C07K1/26;B01D57/02
代理公司: 深圳余梅专利代理事务所(特殊普通合伙) 44519 代理人: 陈余才
地址: 518000 广东省深*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 电泳 分离 回收 用具 及其 使用方法
【说明书】:

发明提供一种用于电泳分离物回收的用具,包括转移管和电泳槽,所述转移管上设置有腔体和用于裁切凝胶块的第一开口;凝胶片段经过所述第一开口从凝胶块上分离并转移至所述腔体内;载有凝胶片段的转移管从凝胶块上方转移至所述电泳槽内。使用转移管作为回收目标电泳分离物过程的承载体后,从裁切到电泳结束过程,被裁切下来的凝胶片段只经过一次裁切和转移,不需要切除凝胶片段上多余的凝胶,电泳完成后也不需要添加缓冲液对凝胶片段破碎离心除去凝胶后取缓冲液,但是,使用转移管电泳后所得的纯化液不含凝胶且体积小。回收过程不需要使用试剂盒,回收率接近100%,回收没有电泳分离物含量、分子量大小的限制,回收效率高且经济环保。

技术领域

本发明涉及电泳分离技术领域,尤其是指一种用于电泳分离物回收的用具及其使用方法。

背景技术

琼脂糖凝胶电泳,是一种广泛应用于生物学、医学和化学领域的实验方法。例如琼脂糖凝胶电泳分离不同片段大小的DNA,其目的在于回收在琼脂糖凝胶中特定大小片段的目标DNA,然后用于酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等。传统的方法中,在分离出含有目标片段的琼脂糖后,先溶解琼脂糖凝胶并用离子交换柱吸附凝胶中的DNA,再通过多种缓冲液洗脱掉凝胶中附着的有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸等杂质,最后把目标DNA洗脱下来才得到回收后的目标DNA。然而,现有技术中存在许多的不足,例如:1)回收的效率不高,通常为60%-80%,如果凝胶中DNA含量低,回收后可能无法继续下一步酶切、PCR、测序、文库筛选、连接、转化等实验;2)回收DNA的量有上限限制,通常为10-15微克;3)回收DNA的片段大小有限制,通常为100bp-10kb,低于100bp或者超过10kb,会导致回收率严重下降或者回收失败;4)实验流程耗费时间久,一个样本的回收时间约为20min,多样本的回收会相应地增加时间的消耗;5)由于目前多数DNA回收的试剂盒依赖进口厂家,耗材昂贵。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是:设计一种不依赖试剂盒、回收率高、耗时短的批量DNA回收方法。

为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:

一种用于电泳分离物回收的用具,包括转移管和电泳槽,所述转移管上设置有腔体和用于裁切凝胶块的第一开口;凝胶片段经过所述第一开口从凝胶块上分离并转移至所述腔体内;载有凝胶片段的转移管从凝胶块上方转移至所述电泳槽内。

进一步地,所述转移管上还设置有便于取出电泳分离物的纯化液的第二开口,所述第一开口与所述第二开口分居所述转移管的两端。

进一步地,所述电泳槽内设置有与所述转移管匹配的槽位。

进一步地,所述转移管竖直放置于所述槽位上,所述电泳槽的正极位于负极上方,所述第二开口位于所述第一开口上方。

进一步地,所述第一开口呈矩形;所述第一开口的长度为A,宽度为B,其中,200mm≤A≤220mm,30mm≤B≤40mm。

进一步地,所述第二开口呈圆形,直径的长度为或所述第二开口呈椭圆形,短轴的长度为C,长轴的长度为D;或所述第二开口呈矩形,长度为E,宽度为F;其中,10mm≤C≤12mm,15mm≤D≤18mm,C≤D,8mm≤E≤12mm,5mm≤F≤6mm,E≥F。

进一步地,所述转移管的高度为H,其中,30mm≤H≤35mm。

进一步地,所述槽位至少设置有两个,所述转移管的数目与所述槽位的数目匹配。

一种用于电泳分离物回收的用具的使用方法,具体步骤为:将转移管的第一开口对准凝胶块上的目标电泳条带,轻轻按压并推动,然后将转移管插入电泳槽内;开启电泳槽,直至电泳结束;最后使用移液枪将电泳液吸取出来。

在轻轻按压并推动的步骤中,所述第一开口裁切出凝胶片段,所述凝胶片段在被裁出的同时还穿过所述第一开口移动至所述腔体内。

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