[发明专利]一种培养肿瘤类器官的方法

权利要求书

1.一种用于培养肿瘤类器官的水凝胶，是以离体的绵羊血浆或其他哺乳动物血浆或人血浆为基质，添加促凝剂和蛋白交联剂后形成的。

2.根据权利要求1所述的水凝胶，其特征在于：所述促凝剂为含钙离子的无机盐或/和有机盐中的任一种或多种；

进一步地，所述促凝剂选自如下任一种或多种：氯化钙、葡萄糖酸钙、磷酸二氢钙、硝酸钙、碳酸氢钙、硫酸氢钙、亚硫酸氢钙、次氯酸钙；

更进一步地，所述促凝剂为氯化钙。

3.根据权利要求1或2所述的水凝胶，其特征在于：所述蛋白交联剂选自如下任一种或多种：戊二醛、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯、双琥珀酰亚胺辛二酸酯、双琥珀酰亚胺酒石酸酯、m-马来酰亚胺基苯甲酰-N-羟基琥珀酰亚胺酯、琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸酯；

进一步地，所述蛋白交联剂为戊二醛。

4.根据权利要求1-3中任一所述的水凝胶，其特征在于：所述水凝胶是以离体的绵羊血浆为基质，添加氯化钙和戊二醛后形成的；其中，氯化钙在所述水凝胶中的浓度为3-6mmol/L，戊二醛在所述水凝胶中的体积百分含量为0.1-0.5％。

5.一种制备用于培养肿瘤类器官的水凝胶的方法，包括如下步骤：以离体的绵羊血浆或其他哺乳动物血浆或人血浆为基质，添加促凝剂和蛋白交联剂后形成所述水凝胶。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述促凝剂为含钙离子的无机盐或/和有机盐中的任一种或多种；

进一步地，所述促凝剂选自如下任一种或多种：氯化钙、葡萄糖酸钙、磷酸二氢钙、硝酸钙、碳酸氢钙、硫酸氢钙、亚硫酸氢钙、次氯酸钙；

更进一步地，所述促凝剂为氯化钙；

和/或

所述蛋白交联剂选自如下任一种或多种：戊二醛、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯、双琥珀酰亚胺辛二酸酯、双琥珀酰亚胺酒石酸酯、m-马来酰亚胺基苯甲酰-N-羟基琥珀酰亚胺酯、琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸酯；

进一步地，所述蛋白交联剂为戊二醛；

和/或

所述方法包括如下步骤：以离体的绵羊血浆为基质，添加氯化钙和戊二醛后形成所述水凝胶；其中，氯化钙在所述水凝胶中的浓度为3-6mmol/L，戊二醛在所述水凝胶中的体积百分含量为0.1-0.5％。

7.一种培养肿瘤类器官的方法，包括如下步骤：

(A1)将待培养的肿瘤细胞与基质混合，使细胞终浓度为5×10³/mL；所述基质为离体的绵羊血浆或其他哺乳动物血浆或人血浆；

(A2)向(A1)中添加促凝剂和蛋白交联剂，混合后得到含有肿瘤细胞的水凝胶溶液；

(A3)将所述含有肿瘤细胞的水凝胶溶液加入到细胞培养容器底-培养箱内平放静置至所述水凝胶溶液凝固；

(A4)向(A3)的水凝胶上方加入肿瘤类器官培养液，培养得到肿瘤类器官。