[发明专利]高效液相色谱法检测血浆吲哚类物质的试剂盒及其应用

说明书

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种高效液相色谱法检测血浆5种吲哚类物质的试剂盒，所述的5种吲哚类物质分别为：硫酸吲哚酚(Indoxyl sulfate，3‑INDS)、吲哚‑3‑乙酸(Indole‑3‑acetic acid，IAA)、吲哚‑3‑丙酸(Indole‑3‑propionate，IPA)、吲哚(Indole，IND)以及3‑甲基吲哚(3‑Methylindole，3‑MI)。本发明所述试剂盒包括如下试剂：流动相、标准品储备液、内标液、萃取液。本发明可同时检测血浆中5种吲哚类物质，检测灵敏度高、前处理过程简单，是一种试剂简单、价格低廉、使用方便的血浆吲哚类物质检测试剂盒。

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种高效液相色谱法检测血浆吲哚类物质的试剂盒及其应用。

背景技术

肠道菌群是寄居在人体肠道内的微生物群，对宿主的健康起着至关重要的作用。在正常情况下肠道菌群与宿主及外部环境之间保持着动态平衡，一旦肠道菌群紊乱，平衡失衡，会引发宿主多种功能的丧失，如屏障功能、炎症和免疫功能丧失等，从而诱发疾病。

肠道菌群主要通过小分子的代谢物与宿主进行密切的相互作用，影响疾病的发生发展。吲哚及其衍生物是色氨酸在肠道菌群作用下的代谢产物，可与芳烃受体相互作用，影响宿主的免疫、代谢和行为等。研究表明这些吲哚类物质与细菌感染、肠道炎症、癌症、糖尿病以及神经系统疾病等密切相关。因此，检测血浆中吲哚类物质对于疾病筛查和病理机制的研究有着重要意义。

目前血浆吲哚类物质常见的检测方法是超高效液相色谱-质谱法，但此方法尚不能广泛普及。相对更为普及的高效液相色谱法也仅对吲哚和三甲基吲哚两种吲哚类物质进行了同时检测，检测范围局限，检测效率低。因此，开发一种简便的高效液相色谱同时检测血浆中多种吲哚类物质的方法对于临床研究有重要价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效液相色谱法同时测定血浆中5种吲哚类物质的试剂盒及其应用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种高效液相色谱法检测血浆中5种吲哚类物质的试剂盒，所述的5种吲哚类物质分别为硫酸吲哚酚(Indoxyl sulfate，3-INDS)、吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid，IAA)、吲哚丙酸(Indole-3-propionate，IPA)、吲哚(Indole，IND)以及3-甲基吲哚(3-Methylindole，3-MI)；

所述试剂盒包括如下试剂：

(1)流动相：

流动相A：10mmol/LNaH₂PO₄溶液；

流动相B：甲醇；

(2)标准品储备液：

含IAA、IPA、IND、3-MI的甲醇溶液以及含3-INDS的甲醇水溶液；

(3)内标液：甲萘酚的甲醇溶液；

(4)萃取液：乙醚/乙酸乙酯。

其中，所述标准品储备液为含100.00μmol/L IAA、60.00μmol/L IPA、4.00μmol/LIND、4.00μmol/L 3-MI 的甲醇溶液以及含4.00mmol/L 3-INDS标准品的甲醇水溶液。

其中，所述内标液为10.00mg/L甲萘酚的甲醇溶液。

其中，所述萃取剂中乙醚与乙酸乙酯的体积比为2:1。

上述的试剂盒的制备方法，包括：

(1)流动相：

流动相A：10mmol/LNaH₂PO₄溶液；