[发明专利]从柑橘加工水中回收柑橘果胶的方法及其用途

权利要求书

1.粗柑橘果胶CCP、果胶组分CP1、果胶组分CP3在制备具有胆酸结合活性的制品中的应用，其特征是：粗柑橘果胶CCP、果胶组分CP1、果胶组分CP3的制备方法为包括以下步骤：

1）、将柑橘加工水浓缩，得浓缩液：

柑橘加工水为将柑橘罐头加工工艺中产生的酸液、碱液混合调配至pH6，而后进行减压浓缩至总碳水化合物含量为10 mg/mL，

将柑橘加工水浓缩至原体积的1/4，得浓缩液；

2）、将所述浓缩液与无水乙醇混合，于4±1℃静置12±2 h，离心，离心所得沉淀用去离子水溶解，得沉淀溶液；

浓缩液：无水乙醇=1:4~6的体积比；

沉淀：去离子水=1：20~30的重量比；

3）、将步骤2）所得的沉淀溶液用木瓜蛋白酶结合Sevag试剂进行脱蛋白处理，然后于去离子水中透析72±6小时，Mw截流2000 Da，接着浓缩、冷冻干燥，得到粗柑橘果胶CCP；

所述Sevag试剂为氯仿：正丁醇=4:1体积比的混合剂；

4）、将粗柑橘果胶CCP进行分离纯化，分别得到CP0、CP1和CP3这三种果胶组分：

将粗柑橘果胶CCP加去离子水配制成浓度为20~25 mg/mL的CCP溶液，离心，所得的上清液用于后续的上样；

选用纤维素 DEAE-52柱，上清液上样；

先用去离子水洗脱，再依次用0.1 M、0.3 M、0.5 M、0.7 M和0.9M的NaCl溶液分别进行洗脱，流速为1 mL/min；上述去离子水、0.1 M、0.3 M、0.5 M、0.7 M和0.9M的NaCl溶液的用量均为2~3.5倍柱体积；

将去离子水对应所得的洗脱液减压浓缩、冷冻干燥，得到果胶组分CP0；

将0.1 M和0.3 M NaCl对应所得的两种洗脱液分别进行如下处理：减压浓缩、透析脱盐、冷冻干燥，对应得到果胶组分CP1和CP3。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述步骤3）为：

按照0.1g/100ml的比例，将木瓜蛋白酶加入至沉淀溶液中，于50±5℃水浴保温3±0.5小时，灭酶活后，离心，取上清液；

将上清液用Sevag试剂进行处理：按上清液:Sevag试剂=4~6:1的体积比，在上清液中加入Sevag试剂搅拌混匀后静置，直至分层；取分层所得的上层溶液反复用Sevag试剂进行处理，直至不再出现蛋白层；所得称为样品溶液；

将所得的样品溶液装入2000 Da透析袋中再置于去离子水中进行透析，透析时间为72±6小时， 将所得的透析液浓缩，再冷冻干燥，得到粗柑橘果胶CCP。