[发明专利]一种小分子有机酸的检测方法

说明书

本发明提出了一种小分子有机酸的检测方法，用液相色谱检测液体、半固体、固体中的多种小分子有机酸含量。液相色谱检测的条件为：色谱柱为Agilent Eclipse plus C18；流动相为乙腈和十二烷基三甲基氯化铵混合物；柱温为20‑30℃；检测波长为200‑400nm；进样量为2‑10μL；流速为0.5‑1.2mL/min。本发明的检测方法采用弱碱性流动相，流动相中加入的正离子对试剂和磷酸氢盐，提高了检测的准确度和灵敏度。

技术领域

本发明涉及G01N30/02技术领域，更具体地，涉及一种小分子有机酸的检测方法。

背景技术

不同种类的小分子有机酸的存在会影响可食用品的风味和品质，草酸等的存在可以在一定程度上提高可食用品的保存能力，柠檬酸、苹果酸、马富酸等的存在可以在一定程度上赋予可食用品一定的水果香味，但是这些有机酸的酸味较强，在可食用品中含量过多会提高酸性，降低适口度。

中国专利CN105092739B提供了一种用液相色谱测定黄酒中有机酸的方法，采用含有磺酸基团、羧酸基团、共聚物键合苯磺酸基团这些基团的阳离子交换柱对黄酒样品前处理，以降低液相色谱检测时其他出峰物质对有机酸检测的影响。中国专利CN111175409A提供了一种高效液相色谱检测番茄中有机酸的方法，采用C18色谱柱，所用流动相为含有甲醇的磷酸氢二钾溶液，在40℃的柱温下进行检测，提高了有机酸检测的精确度。

本申请提出了一种小分子有机酸的检测方法，可以用于检测液体、半固体、固体中的小分子有机酸，检测快速，精确度高、灵敏度高。

发明内容

本发明提出了一种小分子有机酸的检测方法，包括以下步骤：

(1)配置对照品溶液：分别取草酸标准品、酒石酸标准品、苹果酸标准品、乳酸标准品、柠檬酸标准品、丁二酸标准品、富马酸标准品，用溶剂配置成一系列浓度梯度的对照品溶液；

(2)对照品溶液检侧：将对照品溶液用液相色谱检测，得到标准曲线；

(3)样品制备：将样品进行前处理，得到样品溶液；

(4)样品检测：将制备好的样品溶液进行液相色谱检测。

在一种优选的实施方式中，所述步骤(1)中草酸标准品、酒石酸标准品、丁二酸标准品的梯度浓度为0.1mg/mL，0.2mg/mL，0.5mg/mL，1.0mg/mL， 2.0mg/mL；所述步骤(1)中苹果酸标准品、乳酸标准品、柠檬酸标准品的浓度为0.05mg/mL，0.1mg/mL，0.2mg/mL，0.5mg/mL，1.0mg/mL；所述步骤(1) 中富马酸标准品的梯度浓度为1μg/mL，5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL。

在一种优选的实施方式中，所述液相色谱检测的条件如下：

色谱柱为Agilent Eclipse plus C18；

流动相为乙腈和十二烷基三甲基氯化铵混合物；

柱温为20-30℃；

检测波长为200-400nm；

进样量为2-10μL；

流速为0.5-1.2mL/min。

在一种优选的实施方式中，所述液相色谱检测的条件如下：

色谱柱为Agilent Eclipse plus C18，规格为250*4.6，5μm；

流动相为乙腈和十二烷基三甲基氯化铵混合物；

pH为7.8；

柱温为25℃；

检测波长为210nm；