[发明专利]一种线性硬毛藻提取的粗多糖在制备非酒精性脂肪性肝药物中的应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体为一种线性硬毛藻提取的粗多糖在制备非酒精性脂肪性肝药物中的应用，包括以下步骤：多糖提取、设置分组、饲养条件、进行建模、建模后检测。本发明通过实验证明，从野生毛藻中用热水提取粗多糖CLH，在高脂诱导的NAFLD小鼠模型中，粗多糖CLH具有抑制肥胖，降低血糖，减少肝脏脂质蓄积，起到对NAFLD的治疗作用，基于CLH治疗NAFLD的良好作用，其可用于NAFLD患者的临床治疗药物的研发，效果显著优于其他试药。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体为一种线性硬毛藻提取的粗多糖在制备非酒精性脂肪性肝药物中的应用。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是慢性肝病(如肝纤维化和肝癌)和代谢紊乱(如肥胖、Ⅱ型糖尿病和动脉粥样硬化)的最常见前兆之一[1]。NAFLD患者无法从这种情况中康复，相反，该疾病会继续发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝细胞纤维化、肝硬化，甚至肝细胞，而且作为代谢综合征的重要组分与心脑血管疾病密切相关，严重影响了人们的身体健康和生活质量，也给社会带来沉重负担。除了饮食和运动等干预措施外，目前还没有可用于治疗NAFLD的靶向药物[2]。

毛藻属属于绿藻门，是生长在河口和海洋环境[3]中的不分枝丝状单细胞绿藻。大约76种已知的毛形属[4]。其中，亚麻属植物具有很高的湿度，干燥后的残渣主要由蛋白质和碳水化合物组成。毛藻主要作为生态调节剂调节河口生境的营养有效性，是一种膳食纤维，含有多种微量元素[5,6]。毛藻在我国分布广泛，在医药和食品研究中均有应用。

最近，我们在中国荣城天鹅湖沿岸采集了一种野生毛藻，经提取、纯化和鉴定了多糖，发现提取的多糖几乎是硫酸阿拉伯半乳聚糖。因此本发明旨在研究线性硬毛藻提取的粗多糖在治疗小鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。

发明内容

针对相关技术中的问题，本发明提出的一种线性硬毛藻提取的粗多糖在制备非酒精性脂肪性肝药物中的应用，以克服现有相关技术所存在的上述技术问题，本发明的目的是从野生毛藻中用热水提取粗多糖CLH，在高脂诱导的NAFLD小鼠模型中，粗多糖CLH具有抑制肥胖，降低血糖，减少肝脏脂质蓄积，起到对NAFLD的治疗作用，基于CLH治疗NAFLD的良好作用，其可用于NAFLD患者的临床治疗药物的研发，效果显著优于其他试药。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供一种线性硬毛藻提取的粗多糖在制备非酒精性脂肪性肝药物中的应用，包括以下步骤：

(1)多糖提取：将野生毛藻在55℃干燥后粉碎，后脱脂脱盐并浓缩冻干，用热水提取粗多糖得CLH；

(2)设置分组：将野生型雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和预防组，每组包含小鼠6只；

(3)饲养条件：分笼饲养于SPF级动物饲养室，每笼3只小鼠，鼠龄为8周，所有小鼠先用普通维持饲料饲养一周，以便使小鼠适应环境；

(4)进行建模：适应环境之后开始进行建模，模型组(HFD)和治疗组(CLH-50、CLH-150)小鼠给予高脂饲料，对照组(NC)给予普通维持饲料，每天一次15g定量补给饲料，保证50g/笼；

高低剂量治疗组小鼠分别给予CLH 150mg/kg/天和50mg/kg/天，溶解在蒸馏水中口服，模型组和对照组给予等体积的蒸馏水；

(5)建模后检测：建模9周后通过腹腔注射葡萄糖进行空腹血糖指标及糖耐量检测，于10周进行摘眼球取血并用断颈法将小鼠处死，检测小鼠血糖血脂四项指标(TC、TG、LDL-c、HDL-c)和肝功指标(AST和ALT)，取小鼠新鲜肝脏组织进行匀浆，检测肝脏内TC和TG的含量，另取肝组织做石蜡和冰冻切片，分别进行H.E.和油红O染色。