[发明专利]叶酸和维生素B12联合检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种叶酸和维生素B12联合检测试剂盒，包括检测卡、标准曲线对照表、样本处理液，所述检测卡包括卡壳、设置在卡壳中的测试条，所述测试条包括底板、依次粘附在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫；所述结合垫上包被有量子点标记的叶酸抗体和量子点标记的维生素B12抗体的混合物，所述硝酸纤维素膜采用纳米微球标记叶酸抗原和维生素B12抗原的方式实现两种蛋白的同时检测；所述标准曲线对照表设置在条形码或SD卡上，条形码印在卡壳的表面。还公开了一种叶酸和维生素B12联合检测试剂盒的制备方法。本发明灵敏度高、准确性好、方便快捷、成本低，能够对样本中的叶酸和维生素B12成分进行同时检测。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别是涉及一种叶酸和维生素B12联合检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

叶酸是一种水溶性B族维生素，是由喋呤啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸等组成的化合物。叶酸对人体的重要营养作用早在1948年即已得到证实，人类(或其他动物)如缺乏叶酸可引起巨幼红细胞性贫血以及白细胞减少症，还会导致身体无力、易怒、没胃口以及精神病症状。此外，研究还发现，叶酸对孕妇尤其重要。孕妇缺乏叶酸，可使先兆子痫、胎盘剥离的发生率增高，患有巨幼红细胞贫血的孕妇易出现胎儿宫内发育迟缓、早产及新生儿低出生体重。怀孕早期缺乏叶酸，还易引起胎儿神经管畸形(如脊柱裂、无脑畸形等)。

维生素B12又叫钴胺素，是一种含有3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环(与卟啉相似)，是维生素B12分子的核心。自然界中的维生素B12都是微生物合成的，高等动植物不能制造维生素B12。维生素B12的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏。

维生素B12可提高叶酸利用率，与叶酸一起合成甲硫氨酸(由高半胱氨酸合成)和胆碱，产生嘌呤和嘧啶的过程中合成氰钴胺申基先驱物质如甲基钴胺和辅酶B12，参与许多重要化合物的甲基化过程。维生素B12缺乏时，从甲基四氢叶酸上转移甲基基团的活动减少，使叶酸变成不能利用的形式，导致叶酸缺乏症。维生素B12和叶酸缺乏的临床表现基本相似，都可引起巨幼红细胞性贫血、白细胞和血小板减少，以及消化道症状如食欲减退、腹胀、腹泻及舌炎等。

叶酸和维生素B12是蛋氨酸合成的反应途径中的组成部分，两者中任何一种的缺失都将影响该途径并导致相似的临床症状。此外该普通的代谢途径还将引起这样的结果，即维生素B12的无效会破坏叶酸进入红细胞，这将会导致即便叶酸的摄入正常也会引起红细胞内叶酸浓度的下降。由于上述原因，在临床工作中一般应同时检测两种维生素。因此开发一种可体外对人体叶酸和维生素B12联合检测的试剂盒，在临床诊断中有助于有效查找分析妊娠期女性贫血的原因，评估病情，以有效控制和预防贫血，提高胎儿的发育。

目前将硝酸纤维素膜(NC膜)作为反应载体的侧向层析类检测试剂，其包被蛋白的方式是直接将蛋白吸附在NC膜上，所得到的蛋白量相对有限，且蛋白在NC膜上的排布是无序的，因此亟需提供一种新型的叶酸和维生素B12联合检测试剂盒来解决上述问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种灵敏度高、准确性好、方便快捷、成本低的叶酸和维生素B12联合检测试剂盒及其制备方法，能够对样本中的叶酸和维生素B12成分进行同时检测。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种叶酸和维生素B12联合检测试剂盒，包括检测卡、标准曲线对照表、样本处理液，所述检测卡包括卡壳、设置在卡壳中的测试条，所述测试条包括底板、依次粘附在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫；

所述结合垫上包被有量子点标记的叶酸抗体和量子点标记的维生素B12抗体的混合物，所述硝酸纤维素膜采用纳米微球标记叶酸抗原和维生素B12抗原的方式实现两种蛋白的同时检测；所述标准曲线对照表设置在条形码或SD卡上，条形码印在卡壳的表面。