[发明专利]一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：所述免疫增强剂含有1-1000μg/ml的芸苔素内酯。

2.根据权利要求1所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：包含有灭活的抗原溶液。

3.根据权利要求2所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：还包括油相溶液、水相溶液，所述水相溶液包括免疫增强剂与灭活的抗原溶液，所述水相溶液中免疫增强剂与灭活的抗原溶液的体积之比为1:1.5-4；并且所述水相溶液与油相溶液的体积之比为6:8-16。

4.根据权利要求3所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：所述油相溶液包括油相油剂、油相乳化剂，所述油相乳化剂可以为司班85、司班83、司班80、司班65、司班60、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、吐温85、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸铝中任一种或多种，所述油相油剂可以为药用级白油、花生油、矿物油、植物油中任一种。

5.根据权利要求3或4所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：所述水相溶液还包括水相乳化剂，所述水相乳化剂可以为司班85、司班83、司班80、司班65、司班60、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、吐温85、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸铝中任一种或多种。

6.根据权利要求2-4任一项所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗，其特征在于：所述灭活的抗原溶液为灭活的鸡新城疫与H9亚型禽流感病毒。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗的制备方法，其特征在于：先将免疫增强剂、灭活抗原溶液、水相乳化剂混合，制备成水相溶液；再将油相油剂、油相乳化剂混合，得到油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合，得到灭活疫苗。

8.一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗的制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：

步骤1)将芸苔素内酯溶解于生理盐水中，制成母液，用注射器过滤膜以过滤除菌；

步骤2)将免疫增强剂、灭活的新城疫病毒液、灭活的禽流感H9N2亚型病毒液和吐温80按照预设的体积比混合制备水相溶液，并且在混合加入吐温80 后立即水浴，振荡、混匀；

步骤3)将司班80和白油按照预设的体积比混合，并另外加入硬脂酸铝制备获得油相溶液；

步骤4)将油相溶液与水相溶液混合，通过高速乳化机搅拌，得到基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗。

9.根据权利要求8所述的一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗的制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：

步骤1)称取30mg的芸苔素内酯，溶解于含10％乙醇的10ml生理盐水中，制成浓度为3mg/ml的母液，用注射器过0.22μm的滤膜，过滤除菌；

步骤2)将免疫增强剂、灭活的新城疫病毒液、灭活的禽流感H9N2亚型病毒液和吐温80按照2：1.88：1.8：0.24的体积比混合制备水相溶液，并且在混合加入吐温80后立即水浴5min，振荡、混匀；

步骤3)将司班80和白油按照1：19的体积比混合，并另外加入0.06mg的硬脂酸铝制备获得油相溶液；

步骤4)将油相溶液与水相溶液混合，通过高速乳化机13000rmp/min搅拌5min，得到基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗。

10.一种基于免疫增强剂芸苔素内酯的灭活疫苗的应用。