[发明专利]一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法

说明书

本发明公开了一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法，包括步骤一，制作氯金酸水溶液；步骤二，制作还原剂；步骤三，制备试剂；步骤四，离心处理；步骤五，加入稳定物；步骤六，打包分装；所述步骤三中，改变1号试剂的柠檬酸三钠水溶液用量，改为2ml、3ml或4ml，所述步骤五中，高分子稳定物为天然高分子，取自蛋白质、纤维素、葡萄糖中的一种，本发明相较于现有的三联半定量检测排卵试剂制备方法，通过蔗糖密度梯度离心的方式，使试剂的胶体金颗粒大小更加均匀，减少使用误差；本发明通过增加高分子稳定物的方式，提高了试剂的稳定性，便于其长期储存；本发明通过配置三种试剂并分装打包的方式，增强了其适用性。

技术领域

本发明涉及医药检测试剂技术领域，具体为一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法。

背景技术

临床上在备孕期间可以使用排卵试纸来检测尿液中的促黄体生成素水平，其中半定量试纸主要采用的是单克隆免疫层析技术，可以有效捕捉24h内的排卵，比普通试纸要精准的多，制作试纸就需要使用到特定的试剂，但现有的三联半定量检测排卵试剂的制备方法，得到的试剂胶体金颗粒大小不均匀，容易出现结果误差；现有的三联半定量检测排卵试剂的制备方法，得到的试剂易出现沉积，不利于长时间的储存；现有的三联半定量检测排卵试剂的制备方法，得到的试剂种类单一，无法满足使用者的需求，不利于和产品的推广。

发明内容

本发明的目的在于提供一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法，包括以下步骤：步骤一，制作氯金酸水溶液；步骤二，制作还原剂；步骤三，制备试剂；步骤四，离心处理；步骤五，加入稳定物；步骤六，打包分装；

其中在上述步骤一中，将一定量的金粉投入烧杯中，加入浓盐酸然后不断搅拌，加热到一定温度后，使用分液漏斗滴加双氧水和浓盐酸，反应一定的时间后得到氯金酸溶液，在100℃下蒸发至粘稠状，再加入水溶液进行稀释，得到1、2、3号三份不同浓度的氯金酸水溶液，以备使用；

其中在上述步骤二中，将小苏打溶于水后加入柠檬酸进行中和，反应一段时间后制得柠檬酸三钠，再向柠檬酸三钠中加入水制得柠檬酸三钠水溶液，然后取五倍子粉碎、筛选，放入铜罐中加入软水进行提取，提取液分离后进行减压浓缩，再加入少量乙醚，进行喷雾干燥，得到的鞣酸加入水制备成鞣酸水溶液，再取白磷在双蒸水中切成小块，并放在滤纸上吸干水分，然后迅速放入备好的乙醚中，轻轻晃动，带完全溶解后得到白磷乙醚溶液，将上述还原剂置入深色密封瓶内以待使用；

其中在上述步骤三中，取步骤一中制备的1号氯金酸水溶液200ml加热至沸腾，不停搅拌并加入柠檬酸三钠水溶液1.5ml，搅拌2-3min后继续进行煮沸10-15min，在冷却后加入蒸馏水使其恢复至原体积，制得1号试剂，然后取2号氯金酸水溶液200ml，加入5ml柠檬酸三钠水溶液、12ml鞣酸水溶液以及12ml碳酸钾水溶液，加热1-2h，并保持煮沸5-1min，制得2号试剂，再取3号氯金酸水溶液200ml，加入3ml碳酸钾水溶液、2ml白磷乙醚溶液，将其混合均匀后放置在室温下10-15min，然后回流煮沸，制得3号试剂；

其中在上述步骤四中，取步骤三中值得的1、2、3号试剂，分别进行蔗糖密度梯度离心，得到含有胶体金颗粒大小均匀的三份试剂；

其中在上述步骤五中，取步骤四中离心后的三份试剂，分别加入一定量的高分子稳定物，在反应一段时间后，得到更加稳定的试剂；

其中在上述步骤六中，取步骤五中得到的试剂，将每份试剂均分成三组，并将三份不同的试剂瓶打包组装在一起，获得三组最终的试剂组。

优选的，所述步骤一中，1号氯金酸水溶液浓度为0.01％，2号氯金酸水溶液浓度为0.012％，3号氯金酸水溶液浓度为0.013％。

优选的，所述步骤三中，柠檬酸三钠水溶液浓度为1％，鞣酸水溶液浓度为1％，白磷乙醚溶液的饱和度为1/5。