[发明专利]一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法有效
申请号: | 202111559474.6 | 申请日: | 2021-12-20 |
公开(公告)号: | CN114252632B | 公开(公告)日: | 2023-09-05 |
发明(设计)人: | 宋晓峰;胡培丽;余强华 | 申请(专利权)人: | 金华科生物技术河北有限公司 |
主分类号: | G01N33/76 | 分类号: | G01N33/76 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 065703 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 三联 定量 检测 排卵 试剂 制备 方法 | ||
1.一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,包括以下步骤:步骤一,制作氯金酸水溶液;步骤二,制作还原剂;步骤三,制备试剂;步骤四,离心处理;步骤五,加入稳定物;步骤六,打包分装;其特征在于:
其中在上述步骤一中,将一定量的金粉投入烧杯中,加入浓盐酸然后不断搅拌,加热到一定温度后,使用分液漏斗滴加双氧水和浓盐酸,反应一定的时间后得到氯金酸溶液,在100℃下蒸发至粘稠状,再加入水溶液进行稀释,得到1、2、3号三份不同浓度的氯金酸水溶液,以备使用;
其中在上述步骤二中,将小苏打溶于水后加入柠檬酸进行中和,反应一段时间后制得柠檬酸三钠,再向柠檬酸三钠中加入水制得柠檬酸三钠水溶液,然后取五倍子粉碎、筛选,放入铜罐中加入软水进行提取,提取液分离后进行减压浓缩,再加入少量乙醚,进行喷雾干燥,得到的鞣酸加入水制备成鞣酸水溶液,再取白磷在双蒸水中切成小块,并放在滤纸上吸干水分,然后迅速放入备好的乙醚中,轻轻晃动,带完全溶解后得到白磷乙醚溶液,将上述还原剂置入深色密封瓶内以待使用;
其中在上述步骤三中,取步骤一中制备的1号氯金酸水溶液200ml加热至沸腾,不停搅拌并加入柠檬酸三钠水溶液1.5ml,搅拌2-3min后继续进行煮沸10-15min,在冷却后加入蒸馏水使其恢复至原体积,制得1号试剂,然后取2号氯金酸水溶液200ml,加入5ml柠檬酸三钠水溶液、12ml鞣酸水溶液以及12ml碳酸钾水溶液,加热1-2h,并保持煮沸5-1min,制得2号试剂,再取3号氯金酸水溶液200ml,加入3ml碳酸钾水溶液、2ml白磷乙醚溶液,将其混合均匀后放置在室温下10-15min,然后回流煮沸,制得3号试剂;
其中在上述步骤四中,取步骤三中制得的1、2、3号试剂,分别进行蔗糖密度梯度离心,得到含有胶体金颗粒大小均匀的三份试剂;
其中在上述步骤五中,取步骤四中离心后的三份试剂,分别加入一定量的高分子稳定物,在反应一段时间后,得到更加稳定的试剂;
其中在上述步骤六中,取步骤五中得到的试剂,将每份试剂均分成三组,并将三份不同的试剂瓶打包组装在一起,获得三组最终的试剂组。
2.根据权利要求1所述的一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,其特征在于:所述步骤一中,1号氯金酸水溶液浓度为0.01%,2号氯金酸水溶液浓度为0.012%,3号氯金酸水溶液浓度为0.013%。
3.根据权利要求1所述的一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,其特征在于:所述步骤三中,柠檬酸三钠水溶液浓度为1%,鞣酸水溶液浓度为1%,白磷乙醚溶液的饱和度为1/5。
4.根据权利要求1所述的一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,其特征在于:所述步骤三中,改变1号试剂的柠檬酸三钠水溶液用量,改为2ml、3ml或4ml。
5.根据权利要求1所述的一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,其特征在于:所述步骤三中,2号试剂所需碳酸钾水溶液浓度为25mmol/L,3号试剂所需碳酸钾水溶液浓度为10mmol/L。
6.根据权利要求1所述的一种三联半定量检测排卵试剂的制备方法,其特征在于:所述步骤五中,高分子稳定物为天然高分子,取自蛋白质、纤维素、葡萄糖中的一种。
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