[发明专利]抗PD-L1与OX40双特异性抗体及其用途

权利要求书

1.一种抗PD-L1与OX40双特异性抗体，其特征在于：所述双特异性抗体包括IgG重链、轻链、连接到重链的C端或N端的纳米抗体部分，所述纳米抗体结构域对第一抗原OX40具有结合特异性，IgG重链结构域对第二抗原PD-L1具有结合特异性。

2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述双特异性抗体选自全人源抗体、人源化抗体、嵌合抗体或重组抗体的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述纳米抗体为全人源抗人OX40单克隆纳米抗体，包括重链可变区，所述重链可变区包含CDR1区、CDR2区和CDR3区，其中该CDR1区、CDR2区和CDR3区分别包含SEQ ID NO:34、35、36，所示氨基酸序列的任意一种或与其任意一种具有至少80％序列同一性的同源序列。

4.根据权利要求1或3所述的双特异性抗体，其特征在于：所述纳米抗体包括具有SEQID No:13、14、15的氨基酸序列或者具有与SEQ ID No:13、14、15至少90％、95％、96％、97％、98％相似性的氨基酸序列。

5.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述纳米抗体为：四聚体纳米抗体融合蛋白，连接在IgG1 Fc的N端，如SEQ ID NO:15所示；和/或，二聚体纳米抗体融合蛋白，连接在IgG1 Fc的N端，如SEQ ID NO:14所示。

6.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述重链为PD-L1抗体的IgG1重链，所述重链包括具有SEQ ID No:10、12、17、20、23、26的氨基酸序列或者具有与SEQ IDNo:10、12、17、20、23、26至少90％、95％、96％、97％、98％相似性的氨基酸序列。

7.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述轻链为PD-L1抗体的κ轻链，所述κ轻链包括具有SEQ ID No:9、11、16、18、19、21、22、24、25、27的氨基酸序列或者具有与SEQ ID No:9、11、16、18、19、21、22、24、25、27至少90％、95％、96％、97％、98％相似性的氨基酸序列。

8.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述双特异性抗体还包括人IgG1框架区域的CH1、CH2、CH3。

9.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述IgG结构域包括IgG1恒定区，所述IgG1恒定区具有SEQ ID No:7的氨基酸序列或者具有与SEQ ID No:7至少90％、95％、96％、97％、98％相似性的氨基酸序列。

10.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：连接可变区和重链IgG结构之间的linker部分为一段氨基酸序列，其接头为(GGGGS)n，其中n＝0-4。

11.根据权利要求1-10任一项所述的双特异性抗体，其特征在于：所述抗体是IgG1形式的抗体或IgG2形式或IgG4形式的抗体或抗原结合片段，其Fc结构域分别IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或相应工程化亚型。

12.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：所述轻链和重链的氨基酸序列分别为：SEQ ID No:9和SEQ ID No:10，或SEQ ID No:16和SEQ ID No:17，或SEQ ID No:19和SEQ ID No:20，或SEQ ID No:22和SEQ ID No:23，或SEQ ID No:25和SEQ ID No:27。

13.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于：其分离的抗体或其抗原结合部分，在ELISA水平与人OX40或PD-L1结合。