[发明专利]BHK-21细胞克隆株及利用BHK-21细胞克隆株全悬浮培养新城疫病毒的方法在审
| 申请号： | 202111555429.3 | 申请日： | 2021-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN114317403A | 公开（公告）日： | 2022-04-12 |
| 发明（设计）人： | 周蕾蕾;袁野;朱昊敏;孙灵睿;岳建新;李吉轩;张秀美;李浩鹏;魏杰;安铁军 | 申请（专利权）人： | 乾元浩生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N7/00;A61K39/17;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 100070 北京市丰台区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | bhk 21 细胞 克隆 利用 悬浮 培养 新城 疫病 方法 | ||
1.BHK-21细胞克隆株QYHZZ-BHK-21，其特征在于，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2021133。
2.权利要求1所述的BHK-21细胞克隆株QYHZZ-BHK-21在病毒的全悬浮培养中的应用。
3.权利要求1所述的BHK-21细胞克隆株QYHZZ-BHK-21在病毒疫苗制备中的应用。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述病毒为BHK-21细胞克隆株QYHZZ-BHK-21敏感的动物病毒，优选为新城疫病毒。
5.一种新城疫病毒的全悬浮无血清培养方法，其特征在于，包括：将权利要求1所述的BHK-21细胞克隆株QYHZZ-BHK-21接种于全悬浮无血清培养基中，再接种新城疫病毒进行全悬浮无血清培养，获得病毒液。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，接种新城疫病毒时的细胞密度为(5.5-8.0)×106个细胞/ml。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述新城疫病毒的接种量为MOI＝0.2-2。
8.根据权利要求5～7任一项所述的方法，其特征在于，所述培养的条件如下：温度36.8-37℃，溶氧45-55％，搅拌转速60-90rpm，pH 7.0-7.2。
9.根据权利要求5～7任一项所述的方法，其特征在于，在培养结束后，将细胞破碎后收集病毒液。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，在细胞活率降至70％以下，细胞密度降至2×106个细胞/ml以下时，结束培养。
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