[发明专利]一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法

说明书

本发明公开了一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，包括以下步骤：制备间充质干细胞，制备间充质干细胞抗炎因子，将间充质干细胞抗炎因子与间充质干细胞联合进行局部注射，将间充质干细胞进行静脉回输，定期随访使用者的各项指标变化。本发明的有益效果是：该采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法通过通过间充质干细胞抗炎因子与间充质干细胞联合进行局部注射，以及将间充质干细胞进行静脉回输，在慢性骨骼损伤中取得很好的效果，疗效显著。

技术领域

本发明涉及一种延缓骨骼慢性损伤的方法，具体为一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，属于医疗技术领域。

背景技术

慢性骨损伤一般是关节局部的长期摩擦导致的，由炎症、感染、退化、创伤活其他因素引起的炎性疾病。临床上表现为红、肿、热、痛、功能障碍及骨畸形。严重者导致残疾、影响生活质量。目前的治疗方法是：首先患者需要减少活动，避免受伤的骨组织受力，可以选择使用活血散瘀的药物治疗，同时采用中医按摩、理疗、针灸，外用药物或配合消炎止痛药物治疗。常规的治疗手段并不能控制住损伤的继续发生。

干细胞产业作为再生医学的一部分，已成为一种新兴的健康医药产业。研究者发现，间充质干细胞是一类具有自我更新与多项分化能力的细胞，取材容易、来源广泛。可以分化为骨、软骨、脂肪等多种组织，同时具备免疫调节功能。间充质干细胞破碎后还能产生大量的抗炎因子。间充质干细胞用于骨骼的慢性损伤是一种新的治疗方式。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

本发明通过以下技术方案来实现上述目的，一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，包括以下步骤：

步骤一：制备间充质干细胞，制备间充质干细胞抗炎因子；

步骤二：将间充质干细胞抗炎因子与间充质干细胞联合进行局部注射；

将间充质干细胞进行静脉回输；

步骤三：定期随访使用者的各项指标变化。

优选的，所述在步骤一中，所述间充质干细胞的制备过程为：从液氮中取出制备好的P3代种子细胞，接种至无血清培养基中进行传代培养，培养修箱中培养，标记P4代细胞。

优选的，间充质干细胞融合度为90％以上，收集间充质干细胞，将部分收集好的间充质干细胞使用冻存液，以每只2*10⁷/ml冻存在-80℃冰箱中；将部分间充质干细胞使用盐水，以每支2*10⁷/ml冻存在液氮罐中，然后等待无菌、活率、流式结果。

优选的，所述间充质干细胞抗炎因子是将间充质干细胞通过物理冷冻破碎的方式提取，将盐水冻存的间充质干细胞取出，在37℃水浴锅中复苏，完全溶解后再次放至液氮中10min，再次取出水浴锅中复苏；再次复苏后的细胞悬液以2000r，10min离心去掉细胞碎片，剩下的为间充质干细胞炎症因子；

所述间充质干细胞的制备方式：取冻存液冻存的间充质干细胞，37℃水浴锅中1min复苏完成，第一次洗涤使用转速为1000r，持续时间为10min，滤网孔径采用70um，滤网过滤掉死细胞，第二次洗涤使用转速为1300r，持续6min。

优选的，在步骤二中，将间充质干细胞抗炎因子2ml和间充质干细胞2*10⁷作为1份制剂，根据局部损伤的临床情况选择注射份数，同时配合间充质干细胞静脉回输，间充质干细胞制剂为：间充质干细胞5*10⁷个，95ml生理盐水，5ml白蛋白的混合制剂，局部注射1次配合静脉回输1次，共3次为一个疗程，每次间隔1个月。

优选的，局部注射的部位保持干净，避免感染，两周内应注意清淡饮食，避免食用过敏性食物。